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S不程序抗体筛选准则化操作规程微柱凝集法

集团文件发布号：(9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-

不规则抗体筛

文件名

不规则抗体筛选标准化操作规程(微柱凝集法)

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临床输血安全。

二、方法

采用微柱凝集法；

选标准化操作

规程(微柱凝集法)

一、目的

对交叉配血不合时、有输血史、妊娠史、短期内需多次输血的患者血样本进行不规则抗体筛选，目的为保证临床输血的相容性，确保

三、原理

将被检者血清与筛检红细胞发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。微柱检测系统的上端为反应室，将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中，微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间，反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙，沉积在微柱凝集检测管的底部。

四、适用范围

适用于交叉配血不合、有输血史、妊娠史、短期内需多次输血的患者血样本及供血者

不规则抗体的筛选。

五、仪器设备

普通离心机；血型血清学多用离心机；37℃免疫微柱孵育器；

六、试剂

1、试剂名称：(1)不规则抗体筛检卡(微柱凝集法)

(2)4%筛检细胞(2-8℃保存)；

2、试剂生产厂家：长春博迅生物技术有限责任公司；

3、批准文号：国药准字

4、包装规格：聚丙烯卡12卡×2检测人份/盒；

5、贮藏条件；18-25℃避光保存。

6、有效期：自检定合格之日起12个月；

七、检测样本要求

1、标本类型：普通管静脉血3ml。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤

1、将试剂卡做好标记；

2、分离出被检者血清；

3、将筛检红细胞或谱红细胞配制0.5%-

0.8%浓度，分别加入标记好的微管中，各1滴(50ul)；

4、分别加被检者血清1滴(50ul)；

5、将加样后的试剂卡置37℃免疫微柱孵育器中孵育15分钟；

6、使用血型血清学多用离心机900rpm离心2分钟，1500rpm离心3分钟，取出肉眼观察结果

。

7、结果判断：根据所提供的筛检红细胞或谱红细胞的反应格局来判定结果。7.1阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。

反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。7.2阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的底部。

筛检细胞反应格局

编号

Ⅰ

Ⅱ

Ⅲ

Rh-hr

D

+

+

+

C

+

-

+

E

-

+

-

c

-

+

+

e

+

-

+

Kidd

Jka

+

+

+

Jkb

+

+

+

MNS

M

+

+

+

N

-

+

-

S

-

-

-

s

+

+

+

Duffy

Fya

+

+

+

Fyb

-

-

+

Diego

Dia

-

-

-

Kell

K

-

-

-

k

+

+

+

Lewis

Lea

+

-

-

Leb

-

+

+

P

p1

+

-

-

8、不规则抗体筛选阳性标本可应用已知表现型的8-

12个O型红细胞进一步做不规则抗体鉴定，以便临床用血的筛选。

九、质量控制

1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评，且成绩合格；

2、每日做室内质量控制，且要求在控。

3、严格执行查对制度，判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误等引起的差错。

4、检测标本应在2~8℃保存留一周，以备复查。

十、生物参考区间

阳性，阴性。

十一、注意事项

1、检测标本必须正确有标识，其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态；

2、输血前检查要求是输血前3天内的血样(预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体)。3、标本血液离体后要求尽快送检，至检测完毕最长不能超过3d，每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃~8℃保存7天；4、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效；5、注意离心力、温度、红细胞浓度及抗原抗体的比例对检测结果的影响