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第六节造血干细胞的制备技术造血干细胞移植(HSCT):指对患者进行全身照射、化疗、免疫抑制剂处理后,输入从供者骨髓、外周血或脐带血中分离出的造血干细胞,以使其重建造血及免疫功能。造血干细胞移植过程包括:①大剂量化疗或化疗+放疗,以清除肿瘤细胞并使植入的造血细胞能够植活;②输入造血干细胞;③在造血干细胞植活前的支持治疗;④免疫抑制剂预防移植物抗宿主病。不同来源造血干细胞的优缺点干细胞来源优点缺点备注骨髓含丰富的造血干细胞含淋巴细胞比外周血干细胞少,GVHD较少采集时需要麻醉较外周血干细胞中祖细胞少是传统的造血干细胞来源,已有丰富经验外周血干细胞(PBSC)含大量干细胞含大量淋巴细胞,移植物抗肿瘤效果更强供者需要G-CSF进行动员,花费时间较长更多用于自体HSCT多用于减低剂量预处理方案的异基因HSCT脐带血干细胞采集对母亲及婴儿均无危险传播感染性疾病的可能性较小容易获得淋巴细胞免疫功能不成熟淋巴细胞免疫功能不成熟,需要更长时间才能产生移植物抗肿瘤效应能为儿童提供足够的干细胞,而对大体重儿童及成人来说细胞数量不足越来越多的作为儿童无血缘供者移植的首选一、外周血造血干细胞(PBSC)(一)外周血造血干细胞动员定义:指将造血干/组细胞从骨髓中动员到外周血的过程。动员方法包括应用造血生长因子、骨髓抑制性化疗,或骨髓抑制性化疗+造血生长因子。一、外周血造血干细胞(一)外周血造血干细胞动员1.肿瘤患者Auto-PBSC移植:一般采用化疗+造血生长因子进行动员,化疗结束后第1天开始用G-CSF或GM-CSF,连续应用直至PBSC采集结束。2.异体供者:只能单独使用造血生长因子进行动员,剂量为G-CSF10mg/kg/d,皮下注射,连续注射4~8天,一般于用药第4或第5天采集PBSC(二)PBSC采集和处理采用全自动血细胞分离机连续分离外周血中单个核细胞。所采集的CD34+细胞数量应达到2×106/kg受者体重。二、脐带血干细胞脐血干细胞及免疫细胞功能不成熟,因而GVHD发生率及严重程度低于其它干细胞移植。脐带血干细胞移植(cordbloodtransplantation,CBT)不要求HLA完全相合。脐带血应在胎盘娩出过程中或娩出后15分钟内进行采集。第七节血液制剂的病毒灭活输血是临床治疗的重要手段,但还可能引起不良反应和副作用,主要的不良反应是输血可以传播疾病,造成受血者感染。从科学发展的趋势分析,输血不可能达到“零危险”,也不可能杜绝经输血传播病毒性疾病。因此研究和使用病毒灭活技术,杀灭和去除血液中可能存在的病毒,进一步提高临床输血安全。概述(一)病毒的灭活或去除要求病毒种类:应能杀灭各种可能经输血传播的病毒;数量:应能杀灭所有存在于血液和血液制剂中的病毒。一、血液制剂病毒灭活的基本要求(一)病毒的灭活或去除1.病毒种类:(1)经输血传播的病毒:HIV、HBV和HCV,均为脂质胞膜病毒,较容易杀灭。(2)微小病毒B19为非脂质胞膜病毒,对外界理化因素抵抗力强,较难杀死,阳性率较低,但感染后后果严重,是目前病每灭活研究中的难点。(3)HAV亦是非脂质胞膜病毒一、血液制剂病毒灭活的基本要求2.病毒灭活和去除能力基本要求:能杀灭或去除可能存在血液和血液制剂中的所有病毒。由于各国各种病毒的流行病学基本情况不同,血液制剂的生产流程和工艺各国也不尽和同,因此血液制剂中可能存在的病毒滴度(即病毒数量)也有差异,因而很难规定统一的要求。一、血液制剂病毒灭活的基本要求2.病毒灭活和去除能力要求是经病毒灭活处理后使血液和血液制剂中病毒滴度降低106以上。应根据实际情况制定符合本国的要求,达到保证输血安全的目的。一、血液制剂病毒灭活的基本要求(二)保持血液和血液制剂中有效成分的活性和保存力对于不同的血液制剂,其活力和存活力的含义也不同。对于细胞成分来讲,必须保持细胞的功能和存活力。(红细胞必须保证其带氧功能和输人体内后的半寿期基本正常;对于血浆制剂,必须保持有效蛋白组分的活性。)一、血液制剂病毒灭活的基本要求理想的病毒灭活去除方法应能有效地杀灭去除病毒同时最大限度地保持有效血液成分的话性和治疗作用!一、血液制剂病毒灭活的基本要求1.用途:血浆用于治疗各种凝血因子缺乏引起的凝血功能障碍,补充凝血因子。2.注意:不应将血浆作为血容量扩充剂使用,因为血浆在各血液成分中是传播病毒危险较大的血液成分。因此当患者需要提高胶体渗透
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