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姜黄素对人宫颈癌细胞株HeLa增殖和凋亡的影响的任务书
任务书:
背景
宫颈癌是全球女性发病率第四高的癌症,每年有50万人死于宫颈癌。姜黄素被普遍认为具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等功效,且对宫颈癌细胞的作用也被广泛研究。然而,其详细的作用机制尚不明确。
研究目的
本研究的目的是探究姜黄素对人宫颈癌细胞株(HeLa)增殖和凋亡的影响,以期为宫颈癌的防治提供科学依据。
研究内容
1.线粒体膜电位检测:
用缓冲盐水处理HeLa细胞,取10^6细胞,用JC-1染色剂检测细胞内线粒体膜电位水平。
2.细胞增殖实验:
将HeLa细胞接种于96孔板,分为对照组和姜黄素处理组,浓度分别为0、10、20、30、40和50μM。用MTT法检测细胞存活情况。
3.细胞凋亡实验:
将HeLa细胞接种于96孔板,分为对照组和姜黄素处理组,浓度分别为0、10、20、30、40和50μM。用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况。
研究方法
1.细胞培养:采用放射性污染的HeLa细胞株,以DMEM培养基培养,加10%胎牛血清和常规的抗生素/抗菌素。在37℃,5%CO2的条件下进行细胞培养。
2.药物处理:将HeLa细胞分为对照组和姜黄素处理组,使用不同浓度的姜黄素处理。
3.线粒体膜电位检测:用JC-1染色剂检测HeLa细胞内线粒体膜电位水平。
4.细胞增殖实验:MTT法检测HeLa细胞存活情况,并计算其增殖率。
5.细胞凋亡实验:用AnnexinV-FITC/PI双染法检测HeLa细胞凋亡情况。
预期结果
1.姜黄素可以抑制宫颈癌细胞HeLa的增殖。
2.姜黄素能显著促进HeLa细胞的凋亡。
3.姜黄素会影响HeLa细胞的线粒体膜电位水平。
参考文献
1.KimSJ,KimJS,ParkES,etal.AntiproliferativeeffectsofcurcuminonthehumanHeLacellline.PharmacolRes2001;44(2):127-3
2.ChenA,XuJ,JohnsonAC.CurcumininhibitshumancoloncancercellgrowthbysuppressinggeneexpressionofepidermalgrowthfactorreceptorthroughreducingtheactivityofthetranscriptionfactorEgr-1.Oncogene2006;25(2):278-87
3.GaoX,XuYX,DivineG,etal.CurcumininducesapoptosisinhumanmelanomacellsthroughaFasreceptor/caspase-8pathwayindependentofp53.ExpCellRes2005;313(9):1960-7
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