EvaGreenqPCR染料分析和总结.docx

EvaGreenqPCR

EvaGreenqPCR染料

适于qPCR和HRM最佳（没有之一）荧光染料

图1.EvaGreen?dyebindstodsDNAviaa“release-on-demand”mechanism.

图1.EvaGreen?dyebindstodsDNAviaa“release-on-demand”mechanism.

图2.EvaGreen无毒，无致突变性，对水生生物无危害性。

图2.EvaGreen无毒，无致突变性，对水生生物无危害性。

EvaGreen

EvaGreen是一种用于实时定量PCR（qPCR）的DNA结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于

SYBRGreenI。除了有相似的光谱特性，EvaGreen有三个主要特点使它区别于SYBRGreenI。

首先，EvaGreen对PCR的抑制性远小于SYBRGreenI。因此，使用EvaGreen进行的qPCR实

验可以使用快速PCR步骤。同时，EvaGreen在实验中可以使用较高的浓度，从而获得远强于SYBRGreenI扩增信号（图3）。较高浓度的EvaGreen也消除了“染料重分布”的缺陷，使EvaGreen既可用于多重PCR，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲线分析（HRM）（图4）。该分析正被越来越多的用于PCR后的基因分型和异源双链分析。由于SYBRGreenI对PCR的抑制性，从而要求其使用浓度必须很低，因此SYBRGreenI无法解决由低浓度造成的染料重分布问题，既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同时，染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性，因为低熔点的DNA链可

能由于这种原因而无法检测到。

特性:极高的灵敏度

特性:

极高的灵敏度

在推荐浓度下使用时可以获得最强的PCR扩增信号。PCR抑制性极小

在推荐浓度下使用时可以获得最强的PCR扩增信号。

PCR抑制性极小

智能化的“按要求释放”DNA结合技术使得EvaGreen对PCR的抑制远小于SYBRGreenI。

智能化的“按要求释放”DNA结合技术使得EvaGreen对PCR的抑制远小于SYBRGreen

I。

和快速PCR兼容

对PCR干扰极小，从而极大的缩短了PCR延伸时间。非常适合HRM分析

对PCR干扰极小，从而极大的缩短了PCR延伸时间。

非常适合HRM分析

无“染料重分布”缺陷，兼容PCR

无“染料重分布”缺陷，兼容PCR后的高分辨率熔解曲线（HRM）分析。

兼容多重PCR

在推荐浓度下使用时，无扩增子之间的染料迁移现象。超强稳定性

在推荐浓度下使用时，无扩增子之间的染料迁移现象。

超强稳定性

在大部分生化条件下非常稳定，可在室温下储存并可反复冻融。安全性好

在大部分生化条件下非常稳定，可在室温下储存并可反复冻融。

安全性好

图6细胞膜穿透性测试表明，EvaGreen几乎不能穿透细胞膜，安全性高优越的兼容性

图6细胞膜穿透性测试表明，EvaGreen几乎不能穿透细胞膜，安全性高

优越的兼容性

和SYBRGREENI光谱相似,和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用EvaGreen替代SYBRGreen1，毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备。?

和SYBRGREENI光谱相似,和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用EvaGreen替代SYBRGreen1，毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备。

第二，

第二，EvaGreen的稳定性极好。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染

料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。与之相反，SYBRGreenI不稳定而且降解后对PCR

抑制性更强。

EvaGreen降低了细胞膜透性，因而比SYBRGreen1更加安全。独立实验室的测试结果显示，

EvaGreen既没有诱变性也没有细胞毒性。相反，虽然SYBRGreenI本身诱变性很弱，但它在细胞中可能抑制了正常DNA的修复机制，使其有诱变增强作用。考虑到PCR的广泛使用，其安全性应该得

到足够重视。

图3.比较Biotium公司的FastEvaGreenmastermix(green)和ABI(blue)和Qiagen(red)fastSYBRGreenmastermixes,显示相比SYBRGreen，E