SD大鼠和ICR小鼠血液学及血清生化参考范围的建立及比较.pdf

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SD大鼠和ICR小鼠血液学及血清生化参考范围的建立及比较

发表时间:2017-10-18T14:26:09.183Z来源:《健康世界》2017年16期作者:钟华1,2谢东2朱建伟1

[导读]在动物实验中,对血液学和血清学检测结果进行评价时应考虑不同性别、周龄及来源对数据的影响。

1.上海交通大学药学院上海200240;2.上海睿智化学研究有限公司上海201203

摘要:目的:建立SD大鼠和ICR小鼠常用血液学及血清生化指标正常值参考范围,并比较不同性别,周龄,及供应商动物结果之间的差

异。方法:血液常规分析使用迈瑞BC5300-vet动物专用五分类全自动血液细胞分析仪,血清生化使用迈瑞BS-380全自动生化分析仪。使用

SPSS17.0统计学软件对检测结果进行t检验。结果:获得4~5周龄和8~9周龄不同性别和供应商SD大鼠和ICR小鼠血液学和血清生化平均值

及正常参考范围;应用SPSS软件T检验分析表明性别、周龄及供应商不同时,同一品系动物的部分血液学和血清生化结果有显著性差异。

结论:在动物实验中,对血液学和血清学检测结果进行评价时应考虑不同性别、周龄及来源对数据的影响。

关键词:SD大鼠;ICR小鼠;血液学;血清生化;正常值参考范围

SD大鼠和ICR小鼠作为药物的药代动力学,药效学及毒理学实验中最常用的啮齿类动物,其血液学及血清生化指标是评价动物健康状

况和实验结果的重要指标。通过正常值参考范围的建立,可以为药物的药效学和毒理学安全等评价提供依据,在后续的相关实验中起到重

要的指导作用。为了满足药物研发临床前实验的需求,本实验对4~5周龄和8~9周龄SD大鼠和ICR小鼠的常用的23项血液学和23项血清生化

指标进行了测定,实验动物分别购自上海的两家啮齿类实验动物供应商。

1.材料与方法:

1.1实验动物实验用动物为SPF级ICR小鼠和SD大鼠,164只动物购自上海上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号SCXK(沪)

2012-0002;158只动物购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,许可证号SCXK(沪)2013-0016。雌雄动物分笼饲养于PVC笼盒中,食

物购自北京科澳协力饲料有限公司,自由饮水和进食,室温20~29oC,湿度30%~70%,每天12小时光照。动物于约4周龄和约8周龄时购

买,在上海睿智化学研究有限公司适应环境约1周后进行实验。进行动物饲养、采血和样品处理的实验室已通过国际实验动物评估和认可委

员会认证,实验方案已通过动物管理及使用委员会的批准。

1.2仪器和试剂

血常规使用迈瑞BC5300-vet动物专用五分类全自动血液细胞分析仪和配套试剂与质控;血清生化采用迈瑞BS380全自动生化分析仪和

配套试剂与质控。实验之前仪器经过校准,仪器本底计数和批内精密度均符合要求。测定时按照仪器标准操作规程和试剂使用说明书操

作。

1.3样品采集

所有样品于上午10:00~12:00进行,乙氟烷麻醉后使用眼眶静脉采血的方法。所得的全血样品中用于血常规检测的部分用EDTA-K2

抗凝;用于血清生化检测的部分不添加抗凝剂,静置约半小时后离心取上清。采样后动物使用二氧化碳安乐死,尸体冷冻保存并集中无害

化处理。

1.4测定方法

1.4.1血液学检测

血液学检测指标包括白细胞总数(WBC),嗜中性粒细胞计数(Neut#),淋巴细胞计数(Lym#),单核细胞计数(Mono#),嗜酸

性粒细胞计数(Eos#),嗜碱性粒细胞计数(Baso#),红细胞总数(RBC),血红蛋白浓度(HGB),平均红细胞体积(MCV),平均

红细胞血红蛋白(MCH),平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC),血红细胞分布宽度(RDW),红细胞压积(HCT),血小板总数

(PLT),平均血小板体积(MPV),血小板分布宽度(PDW),血小板压积(PCT)。

1.4.2血清生化检测

谷丙转氨酶(ALT)采用紫外-乳酸脱氢酶法,谷草转氨酶(AST)采用紫外-苹果酸脱氢酶法,碱性磷酸酶(ALP)采用AMP缓冲液

法,γ-谷氨酰转移酶(g-GT)采用IFCC法,总胆红素(T-bil)采用重氮盐法,直接胆红素(D-bil)采用VOX法,总蛋白(TP)采用双缩

脲法,白蛋白(ALB)采用溴甲酚绿法,尿素氮(BUN)采用紫外-谷氨酸脱氢酶法,葡萄糖(Glu)采用己糖激酶法,总胆固醇(TC)和

甘油三酯(TG)采用氧化酶法,钙(Ca)采用偶氮胂III法,镁(Mg)采用二甲苯胺蓝

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