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- 2024-04-05 发布于上海
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鸡大肠杆菌1型菌毛呈现载体构建及部分功能基因与菌毛表达的相关性研究的任务书
任务书
题目:鸡大肠杆菌1型菌毛呈现载体构建及部分功能基因与菌毛表达的相关性研究
任务背景:
鸡大肠杆菌(AvianPathogenicEscherichiacoli,APEC)是致禽类病原菌之一,能引发多种严重的家禽疾病,具有很高的致病性和毒力。本研究旨在探究APEC菌毛在致病中的作用,以及菌毛的表达与病原性的关联性,为APEC的防控提供理论支持。
任务内容:
1.构建APEC菌毛呈现载体,利用分子生物学技术将APEC菌毛相关基因与载体进行克隆,构建表达菌毛的载体。
2.分析构建的菌毛呈现载体的表达效果,通过Westernblotting等技术鉴定菌毛的表达能力。
3.通过比较不同条件下APEC的菌毛表达情况,分析不同环境因素对菌毛表达的影响。
4.使用遗传学技术,构建菌株中部分与菌毛相关的基因缺失突变体,比较突变体与野生型菌株之间的菌毛表达差异,探究这些基因对菌毛表达和APEC致病性的影响。
5.通过细胞实验等技术,探究菌毛表达和与宿主细胞的相互作用,分析菌毛在APEC致病过程中的作用。
预期结果:
1.成功构建APEC菌毛呈现载体,并证明其在大肠杆菌中的表达能力。
2.分析APEC菌毛表达的影响因素,探究不同环境因素对菌毛表达的影响。
3.构建基因缺失突变体,分析不同基因对菌毛表达和APEC致病性的影响,进一步揭示菌毛在APEC致病中的作用。
4.进一步探究菌毛和宿主细胞的相互作用,加深对菌毛在APEC致病过程中的作用理解。
任务进度计划:
第一年:
1.采购实验所需的材料和设备,准备实验室。
2.构建菌毛呈现载体,通过PCR、克隆和转化技术将质粒构建完成。
3.鉴定质粒,并在细胞水平验证基因表达的可行性。
第二年:
1.验证菌毛呈现质粒在不同条件下APEC菌毛的表达情况。
2.构建突变体,验证不同基因对菌毛表达和病原性的影响。
3.对突变体和野生型菌株进行表型和生理学比较,进一步探究菌毛对APEC致病的作用。
第三年:
1.系统性地探究菌毛和宿主细胞的相互作用,揭示菌毛在致病过程中的作用机制。
2.总结实验结果,撰写论文并申请发表。
3.展开相关学术交流和推广活动,促进研究成果的应用和推广。
预期研究成果:
1.成功构建APEC菌毛呈现载体,并鉴定其表达效果。
2.探究不同环境因素对APEC菌毛表达的影响,揭示菌毛在APEC生物学中的重要作用。
3.构建基因突变体,深入探究与菌毛相关的基因在APEC致病中的作用。
4.系统性地研究菌毛和宿主细胞的相互作用,在揭示APEC致病机理中做出一定的贡献。
5.发表1-2篇SCI论文,提升研究室和所属单位的学术能力和社会影响力。
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