蛋白质一级结构测定.pptVIP

关于蛋白质一级结构测定蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。自从1953年F.Sanger测定了胰岛素的一级结构以来，现在已经有上千种不同蛋白质的一级结构被测定。第2页,共31页，2024年2月25日，星期天蛋白质的一级结构的测定是一项非常复杂的工作第3页,共31页，2024年2月25日，星期天A.样品必需纯（97%以上）；B.知道蛋白质的分子量；C.知道蛋白质由几个亚基组成；D.测定蛋白质的氨基酸组成；并根据分子量计算每种氨基酸的个数。E.测定水解液中的氨量，计算酰胺的含量。（1）测定蛋白质的一级结构的要求第4页,共31页，2024年2月25日，星期天（2）蛋白质分子的一级结构测定方法氨基酸组成分析氨基酸末端分析蛋白质中肽链的拆离肽链的部分降解及肽片断的分离肽段氨基酸顺序测定及肽段重叠二硫键与酰胺基的定位第5页,共31页，2024年2月25日，星期天①测定蛋白质氨基酸残基组成根据蛋白质分子量，计算出构成蛋白质的各种氨基酸的数量；采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法，对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。第6页,共31页，2024年2月25日，星期天②测定蛋白质分子中多肽链的数目通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子量之间的关系，即可确定多肽链的数目。