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hu3D3cSA介导的多药物肺癌预靶向治疗的初步研究的开题报告

开题报告

一、研究背景和意义：

肺癌是世界范围内最常见的癌症之一，同时也是最常见的癌症死亡原因之一。多种化疗、靶向治疗和免疫治疗已被广泛应用于肺癌治疗中，但治疗效果仍然有待进一步提高。因此，需要开发更有效、更安全的肺癌治疗方法，以提高患者生存率和生活质量。

目前，越来越多的研究表明，组合使用多种治疗手段，可以增强疗效并减少副作用。其中，预靶向治疗是一个颇受关注的领域。预靶向治疗是在肿瘤细胞被正式分化和肿瘤形成之前进行的一种治疗手段，其目的是通过选择性干扰和影响肿瘤细胞的分化过程，来阻止肿瘤的形成和发展。然而，目前大多数预靶向治疗仅针对单一的分子靶点，且仍存在毒副作用和抵抗问题。

在此背景下，我们重点研究了一种新的预靶向治疗方法：使用hu3D3cSA同时作用于多个分子靶点，从而增强治疗效果并减少毒副作用。

二、研究目的：

本研究旨在探究hu3D3cSA介导的多药物肺癌预靶向治疗的可行性和疗效，以及其对肺癌HEL细胞的生长、凋亡和侵袭能力的影响。同时，我们还将探究规定剂量下hu3D3cSA的毒副作用和安全性。

三、研究内容和方法：

1、细胞培养

HEL细胞在DMEM培养基中培养，添加10％胎牛血清（FBS）、1％倍半胱氨酸、100单位/mL的青霉素和马来酸链霉素。在环境条件下（温度37°C，CO2浓度5％），定期更换培养基并检查细胞状态。

2、药物筛选和处理

我们已经通过多个分子靶点的抑制作用筛选出了多种药物，试验中使用的药物包括下列药物和其制剂：EGFR-TKI厄洛替尼，BRAF/TGF-βR1双靶向抑制剂LY2157299，PI3K抑制剂BKM120，mTOR抑制剂rapamycin和多靶点抑制剂hu3D3cSA及其制剂。HEL细胞将被分成六组：对照组，单一药物组（厄洛替尼、LY2157299、BKM120、rapamycin），以及多药物组（hu3D3cSA介导的药物组，即使用所有药物的组合）。

3、MTT法检测细胞增殖

利用24孔板分别培养HEL细胞，在每个孔中孵育1×104个细胞。待细胞贴附在培养皿上以后，使用上述各种药物组并按以下浓度比例剂量相反逆序处理。在不同时间点进行MTT法检测。

4、流式细胞术检测凋亡率

HEL细胞根据药物分组的浓度被孵育24小时后，使用20%乙醇在4℃下洗涤一次。随后，细胞使用5ug/mL的AnnexinV-FITC和10ug/mL的裸培血细胞膜抗原（PI）在4℃下流式细胞术检测细胞凋亡率。最终通过计算细胞凋亡率来判断各药物组合的有效性。

5、细胞侵袭实验

将HEL细胞悬浮于基底含有各种使用上述药物组合的细胞培养皿。培养条件没有改变，已知各药物组合的排列顺序。在处理细胞后，从培养皿中分离HEL细胞并统计其数量。通过比较生长的细胞数量来判断各药物组合的疗效。

6、hu3D3cSA毒副作用和安全性的实验研究

本实验组将对规定剂量下的hu3D3cSA进行毒副作用和安全性实验。主要包括血清学、生化指标检查、器官重量测定和组织病理学观察等内容。

四、研究预期成果及意义

本研究将探究hu3D3cSA介导的多药物肺癌预靶向治疗的可行性和疗效，同时还将探究其对肺癌HEL细胞的生长、凋亡和侵袭能力的影响及其毒副作用和安全性。预计该研究的结果将为进一步从多靶点出发开展肺癌治疗提供新思路和实验依据。