菌种扩大培养.pptVIP

感谢大家观看第63页,共63页，2024年2月25日，星期天实例：生产啤酒的酵母菌制作返回第31页,共63页，2024年2月25日，星期天实验室制备的孢子斜面或摇瓶种子移接到种子罐进行扩大培养种子罐培养作用①、使菌种获得足够的数量，②、种子罐中的培养基更接近发酵罐培养的醪液成分和培养条件，譬如通无菌空气，搅拌形式等等，以使菌体适应发酵环境③、使孢子发芽，生长繁殖成菌（丝）体，接入发酵罐能迅速生长。第四节、生产车间种子制备第32页,共63页，2024年2月25日，星期天第33页,共63页，2024年2月25日，星期天第34页,共63页，2024年2月25日，星期天第35页,共63页，2024年2月25日，星期天1、种子罐接种常用接种方法火圈保护法压差法接种第36页,共63页，2024年2月25日，星期天第37页,共63页，2024年2月25日，星期天2、种子罐级数确定种子罐级数的因素：（1）菌种生长特性、孢子发芽及菌体繁殖速度；（2）所采用发酵罐的容积。确定种子罐级数需注意的问题（1）种子级数越少越好，可简化工艺和控制，减少染菌机会（2）种子级数太少，接种量小，发酵时间延长，降低发酵罐的生产率，增加染菌机会（3）虽然种子罐级数随产物的品种及生产规模而定。但也与所选用工艺条件有关。如改变种子罐的培养条件，加速了孢子发芽及菌体的繁殖，也可相应地减少种子罐的级数第38页,共63页，2024年2月25日，星期天细菌：生长快，种子用量比例少，级数也较少，二级发酵。茄子瓶→种子罐→发酵罐霉菌：生长较慢，如青霉菌，三级发酵孢子悬浮液→一级种子罐（27℃,40小时孢子发芽，产生菌丝）→二级种子罐（27℃，10~24小时，菌体迅速繁殖，粗壮菌丝体）→发酵罐放线菌：生长更慢，采用四级发酵酵母：比细菌慢，比霉菌，放线菌快，通常用二级种子第39页,共63页，2024年2月25日，星期天3、影响种子罐种子质量的因素1、培养基：逐步接近发酵培养基2、培养条件：温度、溶氧3、种龄：对数生长期的菌丝细菌霉菌放线菌7-24h16-50h21-64h.4、接种量；第40页,共63页，2024年2月25日，星期天

接种种龄的影响

第41页,共63页，2024年2月25日，星期天接种量的影响通常采用的接种量细菌1~5%酵母菌5~10%霉菌7~15%，有时20~25%植物细胞：30－50％第42页,共63页，2024年2月25日，星期天接种量影响接种量的因素：菌种生长速度一般情况下：以大接种量较为适合适合的接种量的重要性：过大：菌丝生长过快，粘稠，营养基质缺乏，溶氧不足过小：菌丝体生长缓慢，发酵周期延长，产生菌丝团第43页,共63页，2024年2月25日，星期天培养基的影响种子培养基成分要满足以下要求：（1）营养成分适合种子培养的需要（2）选择有利于孢子发芽和菌体生长的培养基；（3）营养上要易于被菌体直接吸收和利用；（4）营养成分要适当丰富和完全，氮源和维生素含量要高，并且成分尽可能与发酵培养基成分一致。（5）营养成分、液体环境（渗透压、氧化还原电极电位、pH、水的离子活度等）要尽可能与发酵培养基相近。第44页,共63页，2024年2月25日，星期天pH通过影响细胞质膜的透性、膜结构的稳定性和物质的溶解性或电离性来影响营养物质的吸收，从而影响微生物的生长速度。质子是一种唯一不带电子的阳离子，它在溶液里能迅速地与水结合成水合氢离子(H3O+等)。在偏碱性条件下，0H-占优势，水合氢离子和0H-对营养物质的溶解度和解离状态，细胞表面电荷平衡和细胞的胶体性质等方面均会产生重大影响；在酸性条件下，H＋可以与营养物质结合，并能从可交换的结合物或细胞表面置换出某些阳离广，从而影响纫胞结构的稳定性；同时由于pH值较低，CO2溶解度降低，某些金属离子如Mn2＋、Ca2+等溶解度增加，导致它们在溶液中的浓度增加，从而对机体产生不利的作用。培养基的pH的影响第45页,共63页，2024年2月25日，星期天第46页,共63页，2024年2月25日，星期天图：原核生物细胞膜上的电子传递链第47页,共63页，2024年2月25日，星期天图：与膜结合的ATP合成酶的结构和功能第48页,共63页，2024年2月25日，星期天第49页,共63页，2024