高考生物复习第十一单元现代生物科技专题第39讲基因工程全国公开课一等奖百校联赛示范课赛课特等奖PPT.pptxVIP

第39讲基因工程;考点一基因工程原理及工具;第3页;2．限制酶选择注意事项;③为防止目标基因和质粒本身环化和随意连接，也可使用不一样限制酶切割目标基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶切点)。

(2)依据质粒特点确定限制酶种类。

①所选限制酶要与切割目标基因限制酶相一致，以确保含有相同黏性末端。;②质粒作为载体必须具备标识基因等，所以所选择限制酶尽可能不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标识基因；假如所选酶切点不是一个，则切割重组后可能丢失一些片段，若丢失片段含复制起点区，则切割重组后片段进入受体细胞后不能自主复制。;[清错破疑]基因工程操作基本工具8个易错点

(1)限制酶是一类酶，而不是一个酶。

(2)限制酶成份为蛋白质，其作用发挥需要适宜理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。

(3)在切割目标基因和载体时要求用同一个限制酶，目标是产生相同黏性末端。

(4)将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。;(5)不一样DNA分子用同一个限制酶切割产生黏性末端都相同，同一个DNA分子用不一样限制酶切割，产生黏性末端普通不相同。

(6)限制酶切割位点应位于标识基因之外，不能破坏标识基因，方便进行检测。

(7)基因工程中载体与细胞膜上物质运输载体不一样。基因工程中载体是DNA分子，能将目标基