贻贝足蛋白fp-5在大肠杆菌中的表达、修饰与功能分析.pdfVIP

第２２卷第１期生物加工过程Ｖｏｌ２２Ｎｏ１

２０２４年１月ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＪａｎ．２０２４

－

ｄｏｉ：１０３９６９／ｊｉｓｓｎ１６７２３６７８２０２４０１００４

贻贝足蛋白ｆｐ５在大肠杆菌中的

表达、修饰与功能分析

１１１，２３１，２

姚林，谢紫莎，王瑞，张鲁嘉，李莎

（１．南京工业大学食品与轻工学院，江苏南京２１１８００；２．南京工业大学材料化学工程国家重点实验室，

江苏南京２１１８００；３．华东师范大学化学与分子工程学院，上海２０１１００）

摘要：将地中海贻贝足蛋白ｆｐ５与不同细菌来源的酪氨酸酶在大肠杆菌中共表达，通过体内修饰获得性能改善

的贻贝足蛋白。在对序列分析和密码子优化的基础上，分别构建包含酪氨酸酶与贻贝足蛋白基因的单载体和双载

体共表达系统，以实现其在大肠杆菌中表达。纯化后的蛋白通过ＮＢＴ／Ｇｌｙ染色试验和酸硼酸盐差异光谱法分析，

表明ｆｐ５发生了不同程度的羟基化修饰，其中ｆｐ５与来源于多刺疣微菌（Ｖｅｒｒｕｃｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍｓｐｉｎｏｓｕｍ）的酪氨酸酶

（ＴｙｒＶｓ）共表达得到的５Ｖｓ质量浓度为１８６ｍｇ／Ｌ，修饰率达到５５２０％，黏附力约为未修饰ｆｐ５的４６倍。与

体外修饰贻贝足蛋白相比，ＴｙｒＶｓ体内修饰得到的５Ｖｓ具有广泛的羟基化水平以及优秀的附着力和黏附力，为生

物医药等领域提供了一种有潜力的生物胶材料。

关键词：贻贝足蛋白；酪氨酸酶；共表达；大肠杆菌；体内修饰

－－－

中图分类号：Ｑ８１２文章编号：１６７２３６７８（２０２４）０１００２５０８

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆｍｕｓｓｅｌｆｏｏｔｐｒｏｔｅｉｎｆｐ⁃５

ｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ

１１１，２３１，２

ＹＡＯＬｉｎ，ＸＩＥＺｉｓｈａ，ＷＡＮＧＲｕｉ，ＺＨＡＮＧＬｕｊｉａ，ＬＩＳｈａ

（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＬｉｇｈｔＩｎｄｕｓｔｒｙ，ＮａｎｊｉｎｇＴｅｃｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１１８００，Ｃｈｉｎａ；

２．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭａｔｅｒｉａｌｓ⁃ＯｒｉｅｎｔｅｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＮａｎｊｉｎｇＴｅｃｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１１８００，Ｃｈｉｎａ；

３．ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＥａｓｔＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１１００，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｃｏ⁃ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭｙｔｉｌｕｓｇａｌｌｏｐｒｏｖｉｎｃｉａｌｉｓｆｏｏｔｐｒｏｔｅｉｎｆｐ⁃５ａｎｄｔｙｒｏｓｉｎａｓｅｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔ

ｂａｃｔｅｒｉａｌｓｏｕｒｃｅｓｉｎＥ．ｃｏｌｉｃｏｕｌｄｐｒｏｄｕｃｅｔｈｅｍｏｄｉｆｉ