茶树炭疽菌CfHTF5基因的功能初探.docxVIP

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摘要

茶树炭疽病是影响茶叶产量和品质的重要原因之一,进而使茶产业发展受到抑制,茶树炭疽菌的生物学性状影响其对茶树的侵染能力、繁殖能力及抗逆性,研究生物学特性用于防治茶树炭疽病有重要意义。在茶树炭疽菌的同源异形盒家族中,挑选其中一个CfHTF15基因进行操作,探讨其功能。通过PCR扩增,融合PCR等技术成功获得用于CfHTF15基因敲除的同源片段AG、GB。进一步通过原生质体转化、筛选等步骤获得敲除CfHTF15基因的缺失突变体。以野生型为参照,通过对比并分析其表型,可以观察到茶树炭疽菌在生长发育形态以及产孢过程中的变化,分析CfHTF15基因的生物学功能。结果表明,CfHTF15基因的缺失对茶树炭疽菌的形态、生长速度、孢子形态、孢子萌发状况、附着胞形成、致病性均无显著影响,初步判断CfHTF15基因对茶树炭疽菌的生长发育不是必需的。

关键词:茶叶;茶树炭疽菌;同源异型盒基因

Abstract

Teaanthraxisoneoftheimportantreasonsaffectingteayieldandquality,whichinturninhibitsthedevelopmentofteaindustry,andthebiologicalcharacteristicsofanthraxaffectitsinfection,reproductiveabilityandstressresistancetoteaplants,andthestudyofbiologicalcharacteristicsisofgreatsignificanceforthepreventionandtreatmentofanthrax.IntheHomeoboxfamilyofColletotrichumfructicola,oneoftheCfHTF15geneswasselectedtoexploreitsfunction.HomologousfragmentsAGandGBforCfHTF15geneknockoutweresuccessfullyobtainedbyPCRamplificationandfusionPCR.Furthermore,thedeletionmutantofknockoutCfHTF15genewasobtainedbyprotoplasttransformationandscreening.Takingthewildtypeasareference,bycomparingandanalyzingitsphenotype,thechangesofthegrowthanddevelopmentmorphologyandspore-productionofC.fructicolacanbeobserved,andthebiologicalfunctionofCfHTF15genecanbeanalyzed.TheresultsshowedthatthedeletionofCfHTF15genehadnosignificanteffectonthemorphology,growthrate,sporemorphology,sporegermination,appressoriumformationandpathogenicityofC.fructicola,anditwaspreliminarilyjudgedthatCfHTF15genewasnotnecessaryforthegrowthanddevelopmentofC.fructicola.

Keywords:Tea;Teaanthrax;Homeobox

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茶树炭疽菌CfHTF15基因的功能初探

引言

1.1茶

茶(Camelliasinensis(L.)O.Ktze.),是山茶科、山茶属灌木或小乔木,嫩枝无毛,叶革质,为长圆形或椭圆形。我国是当今世上最早使用茶的国家,有着茶叶的故乡之称,种植茶树和品茶已经有几千年的历史,且茶叶对现代某些疾病,如心脑血管及癌症等,有一定的药理功效;还有丰富的营养价值,茶叶中的蛋白质含量较高同时还含有丰富的矿物质及微量元素。目前,茶树已逐渐成为我国脱贫攻坚、振兴产业的主要作物之一。至今为止,我国各地对茶叶

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