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研究报告

DOI:10.13995/ki.11-1802/ts.035618

引用格式:朱满志,陈献忠,沈微,等.代谢工程改造酿酒酵母高效合成游离脂肪酸[J].食品与发酵工业,2024,50(2):15-22.

ZHUManzhi,CHENXianzhong,SHENWei,etal.MetabolicengineeringofSaccharomycescerevisiaeforefficientsynthesisof

freefattyacids[J].FoodandFermentationIndustries,2024,50(2):15-22.

代谢工程改造酿酒酵母高效合成游离脂肪酸

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朱满志,陈献忠,沈微,杨海泉,夏媛媛

(江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214122)

摘要该文以酿酒酵母BY4741作为底盘细胞,通过系统代谢工程改造提高游离脂肪酸(freefattyacid,FFAs)

的合成。首先,通过删除酰基CoA合成酶FAA1、FAA4以及FAT1的编码基因,提高FFAs的合成,酵母工程菌株

FFAs达到384.4mg/L。进一步,通过敲除POX1、FAA2和PXA2基因,破坏了酵母细胞的β-氧化途径,使细胞外

FFAs进一步提高,达到了394.9mg/L。随后,通过敲除磷脂酸磷酸酶编码基因DPP1,LPP1,PAH1,降低了磷脂

酸(phosphatidicacid,PA)的去磷酸化水平,上调了获得的多基因缺失的酵母工程菌(Δfaa1Δfaa4Δfat1Δpox1

Δfaa2Δpxa2Δdpp1Δlpp1Δpah1)能够产生497.3mg/L的细胞外游离脂肪酸,以及1332.2mg/L的总脂肪酸。通

过组合代谢工程产生的平台菌株,为未来发展脂质相关的细胞工厂提供了基础。

关键词游离脂肪酸;β氧化;酿酒酵母;磷脂酸;酰基CoA

原油成本的攀升和不稳定、日益增长的环境问后在乙醛脱氢酶(acetaldehydedehydrogenase,ALD)

题,都促使人们对使用微生物生产生物燃料和生物化的作用下生成乙酸,乙酸在乙酰CoA合成酶(acyl-

[1]

学制品的兴趣增加。油化学品是石化产品的替代CoAsynthetase,ACS)的作用下生成乙酰CoA,接着在

品,通常从植物油和动物脂肪中提取,其供应量有乙酰CoA羧化酶(acetylCoAcarboxylase,ACC1)的催

[2]

限。微生物脂肪酸的生物合成已经引起了广泛的化下生成丙二酰CoA,随后脂肪酸合成酶以乙酰CoA

关注,因为它提供了一种可再生油化学品的生产方[6]

以及丙二酰CoA为前体合成脂肪酸(图1)。

[3]

式。游离脂肪酸(freefattyacids,FFAs),即不与其之前的研究表明,通过敲除酰基-CoA合成酶基

他分子结合的脂肪酸,由于其较低的生产和收获成本因FAA1和FAA4,酵母开始分泌FFAs到生长介质

以及可以直接地化学转化为广泛的生物燃料和生化[7][8]