GBT 20190-2006饲料中牛羊源性成分的定性检测仪器耗材配置清单.docx

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原理:根据牛羊遗传物质的特异性,通过检索基因库或专利库,选择牛羊特异性的DNA序列,该序列必须在同类动物(无论什么品种)中都具有高度保守性,而其他动物皆不含有。利用种属特异性的引物通过PCR扩增这一特定的DNA序列,通过电泳分离PCR产物，以标准长度的PCR产物作对照,检测PCR扩增出的这一特定的DNA片断,判断是否含有牛羊源性成分。此外,通过限制性内切酶酶切反应,进一步判断结果。通过对PCR扩增的特定DNA片断进行测序,与标准序列进行比较,来确认检测结果。

产品清单

水

应符合GB/T6682一级水要求

三羟甲基氨基甲烷

Tris，C4H11NO3，77-86-1

盐酸

浓盐酸

水

去离子水

氯化钠

分析纯

乙二胺四乙酸二钠二水合物

二水乙二胺四乙酸二钠，6381-92-6

搅拌器

磁力搅拌器

溴代十六烷基三甲胺

CTAB，C19H42NBr，57-09-0

核糖核酸酶A

RNaseA，9001-99-4

三羟甲基氨基甲烷盐酸盐

Tris-HCl，C4H11NO3，1185-53-1

冰箱

-20℃

三氯甲烷

分析纯

异戊醇

分析纯

异丙醇

分析纯

三水合乙酸钠

CH3COONa·3H2O，6131-90-4

乙酸

冰乙酸

乙醇

75%

正己烷

分析纯

TaqDNA聚合酶

Thermusaquaticus,5U/μL

PCR反应缓冲液

含25mmol/LMg2+

引物

牛源性成分检测用引物(对)序列,5’-GCCATATACTCTCCTTGGTGACA-3’;5’-GTAGGCTTGGGAATAGTACGA-3’

引物

羊源性成分检用引物(对)序列,5’-TATTAGGCCTCCCCCTTGTT-3’;5’-CCCTGCTCATAAGGGAATAGCC-3’

脱氧腺苷三磷酸

dATP

脱氧胞苷三磷酸

dCTP

脱氧鸟苷三磷酸

dGTP

脱氧胸苷三磷酸

dTTP

溴化乙锭

EB，Ethidiumbromide，C21H20BrN3，1239-45-8

手套

一次性

分子量标记

DNA分子量标记，50bp-300bp

硼酸

分析纯

溴酚蓝

C19H10Br4O5S，115-39-9

二甲苯蓝

二甲腈蓝，C25H27N2NaO7S2，4463-44-9

蔗糖

-

冰箱

4℃

琼脂糖

-

PCR产物回收纯化试剂盒

-

限制性内切酶Sau3AI

及反应缓冲液

凝胶回收纯化试剂盒

-

石蜡

石蜡油

DNA测序试剂

-

甲酰胺

-

PCR扩增仪

-

电泳仪

-

凝胶成像仪

或紫外透射仪

DNA序列分析仪

-

灭菌器

高压灭菌锅

水浴箱

100℃

乙醇

95%

离心机

12000r/min离心

离心管

-

冰箱

-20℃

三角瓶

250mL

离心管

100mL

DNA提取试剂盒

-

扩增管

-