糖代谢紊乱的生物化学检验.ppt

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第51页,共53页,2024年2月25日,星期天第52页,共53页,2024年2月25日,星期天感谢大家观看第53页,共53页,2024年2月25日,星期天(二)先天性糖代谢障碍糖代谢的先天性障碍是由于糖代谢相关酶类先天性异常或缺陷,导致某些单糖或糖原在体内贮存。多数为常染色体隐性遗传,患者症状轻重不等,可伴有血糖水平降低。半乳糖代谢紊乱果糖代谢紊乱戊糖代谢紊乱糖原贮积症第19页,共53页,2024年2月25日,星期天第二节糖代谢紊乱的检验空腹血糖餐后2小时血糖葡萄糖耐量试验糖化血红蛋白糖化血清蛋白与糖化白蛋白胰岛素及C肽胰岛素原酮体丙酮酸及乳酸尿微量白蛋白第20页,共53页,2024年2月25日,星期天一、体液葡萄糖空腹血糖(FPG):是在隔夜空腹(至少8-10h未进任何食物)后,早餐前采血所测定的葡萄糖浓度,为糖尿病最常检测的指标,反映胰岛B细胞功能,代表基础胰岛素的分泌功能。随机血糖(RBS):指任意时间抽取血液作为标本所测定的葡萄糖浓度。第21页,共53页,2024年2月25日,星期天一、体液葡萄糖无机化学法特异性差,淘汰。有机化学法干扰因素多,试剂有毒副作用,少用。酶法常用方法(一)标本的采集与处理空腹静脉采血。血清和血浆。抗凝剂最好选择草酸钾-氟化钠抗凝剂。(二)测定方法第22页,共53页,2024年2月25日,星期天(一)无机化学法:Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性(二)有机化学法:邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等Cu2+OH-Cu+Glu磷钼酸显色邻甲苯胺+Glu葡萄糖基胺希夫氏碱蓝绿色化合物缩合脱水分子重排特异性差干扰因素多(三)酶法(1)己糖激酶法(HK法)(2)葡萄糖氧化酶法(GOD法)(3)葡萄糖脱氢酶法(GDH法)第23页,共53页,2024年2月25日,星期天

葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH

NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化分析,特别适用急诊应用,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较贵。1、己糖激酶法(HK法)

原理评价第24页,共53页,2024年2月25日,星期天2、葡萄糖氧化酶法(GOD)原理葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸内酯+H2O2

2H2O2+4-氨基安替比林+酚POD红色醌类化合物+H2O+O2

红色醌类化合物在505nm有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标本中的葡萄糖浓度成正比评价1.操作简单,特异性较高,是血糖测定的首选方法2.GOD-POD法线性范围可达成19mmol/L,回收率94%~105%,变异总数为0.7%~2.0%,准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于自动生化仪。是我国临检中心目前新推荐的常规方法第25页,共53页,2024年2月25日,星期天葡萄糖+NAD+D-葡萄糖酸内酯+NADHNADH生成量在一范围内与标本中葡萄糖浓度成正比关系。在340nm处增高的光密度可以对该酶(GDH)活性或其底物(葡萄糖)进行定量分析。用GDH法测定葡萄糖,不仅特异性高,且只需GDH一种酶参与,一步完成,因而被人们广泛接受和应用。

但是胆红素和血红蛋白含量高时可影响测定结果。脂血标本需做对照管。3.葡萄糖脱氢酶法(GDH)GDH原理评价第26页,共53页,2024年2月25日,星期天空腹血糖:3.9~6.1mmol/L随机血糖:≤7.8mmol/L)肾糖阈:8.88mmol/L,血糖高于此值出现糖尿。临床意义:1.血糖升高:主要见于糖尿病(DM)2.血糖降低:生理性病理性3.药物影响(三)血糖测定参考区间与临床意义第27页,共53页,2024年2月25日,星期天二、餐后2小时血糖(2hPG)口服75g无水葡萄糖或吃100g面粉制成的馒头或方便面(含糖量相当于75g无水葡萄糖)从吃第一口饭的时间计算,抽取2小时后的血液

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