生物化学第二章蛋白质化学.ppt

氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应

（Edman反应）PITC（phenylisothiocyanate）+苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA)（phenylisothiohydantion-AA）弱碱中(400C)(硝基甲烷400C)H+第30页,共59页，2024年2月25日，星期天第二节肽肽是氨基酸通过肽键连接在一起形成的化合物。通常把分子量小于10000的称为肽，而分子量更大的称为蛋白质。第31页,共59页，2024年2月25日，星期天肽键(peptidebond)第32页,共59页，2024年2月25日，星期天氨基末端羧基末端Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu氨基酸残基第33页,共59页，2024年2月25日，星期天几种生物活性肽1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)GSH是体内重要的还原剂第34页,共59页，2024年2月25日，星期天GSH过氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSGGSH还原酶NADPH+H+NADP+谷胱甘肽在体内参与氧化还原过程，作为某些氧化还原酶的辅因子，或保护巯基酶，或防止过氧化物积累。第35页,共59页，2024年2月25日，星期天体内许多激素属寡肽或多肽2.多肽类激素及神经肽由下丘脑分泌，其功能是促进腺垂体释放促甲状腺素(调节糖代谢)。第36页,共59页，2024年2月25日，星期天当我们搬进一个新寝室时，我们会如何向我们的外校的同学对其进行描述？第37页,共59页，2024年2月25日，星期天当你看到这张图片时，你怎么向别人描述？第38页,共59页，2024年2月25日，星期天第三节蛋白质的结构蛋白质的分子结构包括一级结构(primarystructure)二级结构(secondarystructure)三级结构(tertiarystructure)四级结构(quaternarystructure)第39页,共59页，2024年2月25日，星期天第40页,共59页，2024年2月25日，星期天蛋白质结构的主要层次一级结构四级结构二级结构三级结构primarystructuresecondarystructureTertiarystructurequariernarystructure超二级结构结构域supersecondarystructureStructuredoman第41页,共59页，2024年2月25日，星期天一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。蛋白质一级结构第42页,共59页，2024年2月25日，星期天蛋白质一级结构测定流程：

确定多肽链的数目拆开并分离出每条肽链水解测定肽链的氨基酸组成测定肽链两末端氨基酸残基肽链水解为小片段并测序片段重叠得出整个肽链的序列确定二硫键的位置第43页,共59页，2024年2月25日，星期天肽链末端分析N-末端测定

（1）DNFB法（2）PTH法第44页,共59页，2024年2月25日，星期天DNP-氨基酸第45页,共59页，2024年2月25日，星期天第46页,共59页，2024年2月25日，星期天C-末端测定（1）肼解法缺点：Asn，Gln，Cys被破坏，Arg转变为鸟氨酸。第47页,共59页，2024年2月25日，星期天（2）羧肽酶法羧肽酶能特异水解C末端氨基酸残基，其中羧肽酶A能释放除Pro，Arg，Lys以外所有的氨基酸残基，羧肽酶B只能水解以Arg和Lys为C末端残基的肽链。第48页,共59页，2024年2月25日，星期天二硫键的断裂第49页,共59页，2024年2月25日，星期天第50页,共59页，2024年2月25日，星期天肽链的断裂（1）酶裂解法第51页,共59页，2024年2月25日，星期天（2）化学裂解法溴化氰(CNBr)只断裂Met羧基参与形成的肽键。由于大多数蛋白质只含有很少的Met，因此CNBr断裂产生的肤段不多。第52页,共59页，2024年2月25日，星期天Sample第53页,共59页，2024年2月25日，星期天DNP-Glu第54页,共59页，2024年2月25日，星期天第55页,共59页，2024年2月25日，星期天第56页,共59页，2024年2月25日，星期天第57页,共59页，2024年2月25日，星期天蛋白质的化学合成第58页,共59页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第59页,共59页，202