ABO、RH血型检测(试管法)标准操作规程.pdfVIP

、RH血型检测（试管法）标准操作规程

【操作人员】

【部门主管】

【质量控制员】

【目的】

保证测试结果的准确性。

【适用仪器范围】

双目显微镜、普通离心机。

【该SOP变动程序】

该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主

管及科主任签字后生效。

【应用范围】

ABO、RH血型检测的手工操作。

【标本采集和处理】

由临床科室采用真空负压EDTAK2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送

检。检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单

一致。确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号，并按日期

索引进行登记。将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心

10分钟。保证血浆于血球有效分离。溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足

应加以登记，溶血性疾病应注明。

【检查项目】

一、ABO血型

（一）原理

根据红细胞上有或无A抗原或（和）B抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O

型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定

型，是用已知抗-A和抗-B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B

抗原；所谓反定型，是用已知A红细胞B红细胞来测定血清中有无相应的抗-A或

（和）抗-B。

（二）试剂和材料

1．抗-A（B型血）、抗-B（A型血）。

2．5％A、B试剂红细胞盐水悬液。

3．受检者血浆。

4．受检者5％红细胞悬液。

试剂可在室温2～8℃下避光保存至有效期。

1．试管法

(1)正向定型

a．取试管2支，分别标上A、B字样。

b．向A管滴加抗A分型试剂1滴，向B管滴加抗B分型试剂1滴。

c．向A、B管各滴加5％的待检红细胞悬液各1滴。

0

d．混匀（天冷时试管架置37C水浴箱15分钟）后配平衡，在离心机内1000

转/min离心1分钟。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观

察有无凝集（溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以低倍

镜检查。

e．观察结果时，既要看有无凝集、有无溶血，更要注意凝集强度，此有助

于Ａ，Ｂ亚型、类Ｂ或cisＡＢ的发现。

(2)反定型：

a．取试管2支，分别标上A、B字样。

b．向A管滴加A标准红细胞1滴，向B管滴加B标准红细胞1滴。

c．向A、B管各滴加待检标本血浆1滴。

0

d．混匀（天冷时试管架置37C水浴箱15分钟）后配平衡，在离心机内1000

转/min离心1分钟。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观

察有无凝集（溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以低倍

镜检查。

(3)凝集强度判断标准

4+红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。

3+红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。

2+红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。

1+肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。

±镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。

MF混合凝集外观(mixedfield)是指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数

红细胞仍呈分散分布。

-表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。

2．玻片法

(1)正定型：

a．取清洁玻片1张（或白瓷板1块，用蜡笔画格），依次标明抗A、抗B。

b．按标记滴加相应的标准分型血清1滴，分别滴加被检者全血（或10％红

细胞悬液）各1滴，转动玻片混合，室温放置10-15min，以肉眼观察有无凝集

再以低倍镜检查。

(2)反定型：

a．另取玻片1张（或白瓷板1块，用蜡笔画格）