2.2.1 动物细胞培养课件课件-课件2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

动物细胞工程的技术手段动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合生产单克隆抗体——是其他动物细胞工程技术的基础

第2节动物细胞工程2.2.1动物细胞培养

从社会中来皮肤烧伤怎样才能获得大量的自体健康皮肤？通过动物细胞培养构建的人造皮肤可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。借助动物细胞培养构建人造皮肤

动物细胞培养概念：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养条件下，让这些细胞。原理：细胞增殖未体现出细胞的全能性生长和增殖动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件那么，动物细胞培养需要哪些条件呢？

动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境体外培养动物细胞需要满足什么条件？

1.动物细胞培养的条件（1）营养合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分。血清中含有人类尚未全部研究清楚、细胞生长和增殖所必需的物质注意：培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。

（2）无菌、无毒的环境无菌①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作定期更换培养液无毒定期更换培养液的目的是什么？如何防止培养过程中的微生物污染？离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力

（3）温度、PH和渗透压温度为36.5±0.5℃(哺乳动物)pH为7.2～7.4(多数动物细胞)（4）气体环境通常采用培养皿或松盖培养瓶。并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。O2：细胞代谢所必需的。CO2：主要作用是维持培养液的pH。渗透压：维持细胞正常的形态和功能培养皿培养瓶

无菌、无毒的环境营养观察“细胞房”体外培养细胞的图片适宜的温度和PH、气体环境等

2.动物细胞培养的过程从动物体内取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和繁殖。因此，在进行细胞培养时，首先要对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械的方法，或用等处理一段时间，将组织分散成。然后，用培养液将细胞制成，再将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中培养。单个细胞胰蛋白酶、胶原蛋白酶细胞悬液

悬浮型细胞：会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。贴附型细胞:体外培养的动物细胞类型悬浮在培养液中生长增殖（少部分细胞）需贴附于某些基质表面才能增殖生长（多数细胞）细胞贴壁

细胞贴壁现象

悬浮型细胞：会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。贴附型细胞:除受以上因素影响外，还会发生接触抑制现象当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。体外培养的动物细胞类型悬浮在培养液中生长增殖（少部分细胞）需贴附于某些基质表面才能增殖生长（多数细胞）细胞贴壁

癌细胞无接触抑制正常细胞增殖到相互接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续增殖，出现接触抑制的现象。癌细胞细胞膜表面糖蛋白等物质显著减少，失去接触抑制，适宜条件下可以无限增殖，导致细胞发生堆积，多层生长。

思考：如何解决细胞分裂受阻的问题呢？需要对细胞进行分瓶培养，让细胞继续增殖人们通常将分瓶培养之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为。将分瓶后的细胞培养称为。原代培养：原代培养传代培养传代培养：思考：进行传代培养时，如何处理悬浮细胞和贴壁细胞？①悬浮型细胞：直接用离心法收集②贴附型细胞：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养

①取动物组织②制成细胞悬液用胰蛋白酶分散细胞，可说明细胞间物质主要成分？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？那将动物组织分散成单个细胞时要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？选材动物胚胎或幼龄动物的组织原因：细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，易培养消化：用胰蛋白酶(胶原蛋白酶)处理分散成单个细胞

①取动物组织②制成细胞悬液③转入培养液进行原代培养④放入CO2培养箱贴壁生长示意图接触抑制示意图

①取动物组织②制成细胞悬液③转入培养液进行原代培养④放入CO2培养箱⑤分瓶，传代培养转入CO2培养箱思考：细胞可以一直进行传代培养吗？

原代培养单细胞悬液传代培养