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抗肝癌单链抗体的体外亲和力成熟研究的开题报告

摘要

肝癌是一种高发病和高死亡率的癌症，目前尚无完全治愈的方法。因此，发展肝癌治疗的新方法至关重要。单链抗体是一种新型的抗体分子，具有良好的组织渗透性、细胞性和结构特点。因此，开发针对肝癌的单链抗体具有重要的临床应用前景。本文提出研究抗肝癌单链抗体体外亲和力的成熟研究。研究将从构建原核表达载体、转化大肠杆菌、纯化单链抗体等方面展开，并利用表面等离子共振技术分析抗体与靶标的亲和力。该研究可为开发肝癌治疗新药和评估其疗效提供参考。

关键词：单链抗体；肝癌；体外亲和力；表面等离子共振技术

Abstract

Livercancerisahighlyprevalentandfatalcancer,andthereiscurrentlynocompletelycurativemethodavailable.Therefore,developingnewapproachesforthetreatmentoflivercanceriscrucial.Single-chainantibodiesareanewtypeofantibodymoleculewithgoodtissuepenetration,cellularity,andstructuralcharacteristics.Therefore,developingsingle-chainantibodiestargetinglivercancerhasimportantclinicalapplicationprospects.Thisstudyproposesamaturestudyoftheinvitroaffinityofanti-livercancersingle-chainantibodies.Thestudywillbecarriedoutfromtheaspectsofconstructingaprokaryoticexpressionvector,transformingEscherichiacoli,purifyingsingle-chainantibodies,etc.,andusingsurfaceplasmonresonancetechnologytoanalyzetheaffinitybetweenantibodiesandtargets.Thisstudycanprovideareferencefordevelopingnewdrugsforthetreatmentoflivercancerandevaluatingtheirefficacy.

Keywords:single-chainantibody;livercancer;invitroaffinity;surfaceplasmonresonancetechnology

1.引言

肝癌是一种恶性肿瘤，是全球第五大癌症和第三大癌症死亡原因（Bray等，2018）。尽管有许多治疗肝癌的方法，如手术切除、化疗、放疗和介入治疗，但大多数患者的预后仍然不佳。因此，开发新的肝癌治疗方法是迫切需要的。

在遗传工程技术的帮助下，单链抗体(Single-chainantibody,ScFv)成为了一种新兴的抗体分子。与传统的完整抗体相比，ScFv仅包含了重链变量区和轻链变量区的结合部分，形成一个类似Fab片段的结构。ScFv具有良好的组织渗透性、细胞性和结构特点，在肝癌治疗中具有广泛的应用前景（K?hler和Milstein，1975；Rothlisberger等，2005）。

在肝癌治疗中，ScFv作为一种新型治疗药物，承担了不可替代的作用。然而，许多已开发的ScFv的疗效并不理想。ScFv的亲和力是ScFv有效性的重要指标之一。因此，研究ScFv的亲和力在开发新的肝癌治疗方法方面具有重要的意义。

2.研究目的

2.1总体目标

本研究旨在开展针对肝癌的单链抗体体外亲和力的成熟研究。通过构建原核表达载体、转化大肠杆菌、纯化单链抗体等步骤，并利用表面等离子共振技术分析抗体与靶标的亲和力，确定适合用于肝癌治疗的单链抗体。

2.2具体目标

2.2.1构建原核表达载体

本研究将从已有的针对肝癌的ScFv序列中选取一个较为有效的ScFv序列。根据该序列设计引物，采用PCR技术扩增ScFv基因。将ScFv基因连接到适当的原核表达载体（如pET28a等）上，构建重组表达载体。

2.2.2转化大肠杆