植物细胞有丝分裂的制片和观察.ppt

关于植物细胞有丝分裂的制片和观察一、实验目的1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术2.观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征第2页,共26页，2024年2月25日，星期天二、实验原理1.植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝分裂2.在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动态变化3.染色体可被碱性染料着色，便于观察4.根据显微镜下观察到的染色体特点可识别有丝分裂不同时期第3页,共26页，2024年2月25日，星期天三、实验仪器和药品1.仪器：显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、滴管、刀片、玻璃皿2.材料：大蒜3.药品：诺卡氏固定液1mol/L的HCl作为解离液、卡宝品红作为染色液第4页,共26页，2024年2月25日，星期天四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定：实验前3-4d，将大蒜掰成蒜瓣摆在铺有四层纱布的托盘里放入温度为25℃，一定湿度的培养箱中培养，每天换水两次待根长到1~2cm将根剪下用吸水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液（乙醇:冰醋酸=3:1）固定4~24小时。固定的作用：杀死细胞，固定细胞形态，维持染色体的完整性，提高染色效果第5页,共26页，2024年2月25日，星期天四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作（1）解离目的：使组织中的细胞分离开操作：先用95%的酒精漂洗，在HCL中60℃水浴5min左右（c）解离时，细胞已死亡（a）解离充分是实验成功的必备条件注意：（b）解离过度，细胞结构被破坏解离液：1mol/L的HCl第6页,共26页，2024年2月25日，星期天四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作漂洗液：清水（先置于清水中浸泡2min左右）目的：洗去解离液，便于染色次数：2-3次注意：若不漂洗解离过度（HCl作用）影响染色（HCl与碱性染料反应）（1）解离（2）漂洗备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中第7页,共26页，2024年2月25日，星期天四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作（1）解离（2）漂洗（3）取材部位：根尖2-3mm注意：要去除根尖乳白色根冠（根尖分生区）第8页,共26页，2024年2月25日，星期天成熟区伸长区分生区根冠根尖的结构第9页,共26页，2024年2月25日，星期天第10页,共26页，2024年2月25日，星期天第11页,共26页，2024年2月25日，星期天第12页,共26页，2024年2月25日，星期天第13页,共26页，2024年2月25日，星期天第14页,共26页，2024年2月25日，星期天四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作（1）解离（3）取材（2）漂洗（4）染色操作：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者将根尖均匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8分钟后，盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。目的：使细胞分散开，有利于观察注意：染色时敲片的力度要适中染色剂：卡宝品红染液时间：6-8min（使染色体（质）着色）染色时间过长—细胞全被染色，无法观察染色时间过短—染色体颜色过浅，影响观察第15页,共26页，2024年2月25日，星期天第16页,共26页，2024年2月25日，星期天第17页,共26页，2024年2月25日，星期天第18页,共26页，2024年2月25日，星期天四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作解离→漂洗→取材→染色3.观察（1）低倍镜观察：找到分生区细胞特点：细胞呈矩形，排列紧密，有分裂细胞（2）高倍镜观察：在低倍镜的基础上换用高倍镜（3）仔细观察：先找中期，再找其余各时期，注意染色体特点（4）移动观察：慢慢移动装片，完整观察各个时期第19页,共26页，2024年2月25日，星期天四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作解离→漂洗→取材→染色3.观察低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察注意：a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片，观察有丝分裂各个时期。b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细