大黄-黄连调控AMPKULK1Beclin1通路改善dbdb小鼠肝脏胰岛素抵抗的机制_NormalPdf.docxVIP

第30卷第

第30卷第8期2024年4月

Vol.30，No.8Apr.，2024

ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae

·配伍·

大黄-黄连调控AMPK/ULK1/Beclin1通路改善db/db小鼠肝脏胰岛素抵抗的机制

赵泓彰1，白敏1，汪湛东1，宋冰1，2，郭超1，2，刘馨鸿2，王琼1，杨润泽1，汪永锋1，2*，张延英1，2*

（1.甘肃中医药大学，兰州730000；2.甘肃省实验动物行业技术中心，兰州730000）

［摘要］目的：探讨大黄-黄连通过调控腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/UNC-51样激酶1（ULK1）/自噬关键分子苄氯素1（Beclin1）通路减轻db/db小鼠胰岛素抵抗的作用及其机制。方法：采用db/db小鼠，雄性6周龄db/db小鼠60只，随机分为模型组、二甲双胍组（0.26g·kg-1）、大黄-黄连低、中、高剂量组（2.25、4.5、9g·kg-1）；将同周龄db/m小鼠作为空白组，每组12只。连续灌胃给药干预8周，空白组和模型组每日给予等量蒸馏水灌胃，1次/d，观察小鼠生存状态并使用罗氏血糖设备检测空腹血糖（FBG）；采用酶联免疫吸附测定法检测小鼠空腹血清胰岛素（FINS）并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）；采用苏木素-伊红（HE）染色法观察小鼠肝脏病理变化；蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测肝脏组织中AMPK、Beclin1、自噬相关蛋白5（Atg5）及p62蛋白表达水平；免疫荧光检测肝脏组织中自噬相关蛋白1轻链3B（LC3B）、ULK1的蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-timePCR）检测AMPK、Beclin1、Atg5、ULK1、p62mRNA表达水平。结果：与空白组比较，模型组体质量显著升高（P0.01）；FBG、FINS、HOMA-IR水平均有所改变（P0.01）；肝细胞结构紊乱；肝脏组织中AMPK、Beclin1、Atg5蛋白表达水平显著降低（P0.01）；p62蛋白表达水平显著升高（P0.01）；mRNA与蛋白表达水平基本一致。与模型组比较，二甲双胍组、大黄-黄连高、中剂量组体质量明显降低（P0.05）；FBG、FINS、HOMA-IR均有所下降（P0.05，P0.01）；治疗后各组小鼠的肝脏结构损伤均有不同程度减轻；肝脏组织中AMPK、Beclin1、Atg5、LC3B和ULK1蛋白表达升高（P0.05，P0.01），p62蛋白表达下降（P0.01）；且mRNA与蛋白表达水平大致相同。结论：大黄-黄连可以有效改善肝脏胰岛素抵抗，调控AMPK自噬信号通路，减轻db/db小鼠胰岛素抵抗从而有效防治2型糖尿病的发生发展。

［关键词］大黄-黄连；肝损伤；胰岛素抵抗；肥胖型2型糖尿病；腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/UNC-51样激酶1（ULK1）/自噬关键分子苄氯素1（Beclin1）

［中图分类号］R2-0；R33；G353.11；R246.82［文献标识码］A［文章编号］1005-9903（2024）08-0009-08

［doi］10.13422/ki.syfjx［网络出版地址］https:///urlid/11.3495.r0924.002

［网络出版日期］2024-01-1008:44:40

MechanismofRheiRadixetRhizoma-CoptidisRhizomaImproving

LiverInsulinResistanceindb/dbMicebyRegulatingAMPK/ULK1/Beclin1Pathway

ZHAOHongzhang1，BAIMin1，WANGZhandong1，SONGBing1，2，GUOChao1，2，LIUXinhong2，

WANGQiong1，YANGRunze1，WANGYongfeng1，2*，ZHANGYanying1，2*

（1.GansuUniversityofTraditionalChineseMe