缺氧条件下肺岩宁方抑制TC2N的表达对肺癌细胞培养基诱导.doc

缺氧条件下肺岩宁方抑制TC2N的表达对肺癌细胞培养基诱导的HUVEC细胞增殖、迁移侵袭和管腔形成的影响

王薇，徐振晔，邓海滨，马玥，王中奇，王立芳收稿日期：2022-07-30修回日期：

收稿日期：2022-07-30

修回日期：2023-02-06

基金项目：上海市教育委员会科研创新计划重大项目（2017-01-07-00-10-E00064）：源于精气理论的肺岩宁方抗肺癌生长与转移作用机制的研究，负责人：邓海滨。

通讯作者：王立芳，博士，主任医师，硕士研究生导师，主要研究方向：中医药防治恶性肿瘤。

（上海中医药大学附属龙华医院上海200032）

摘要：目的探讨缺氧条件下肺岩宁方（FYN）对肺癌细胞培养基诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖、迁移侵袭和管腔形成的影响。方法使用不同浓度的肺岩宁方（200~-6400μg/·mL-1）处理HUVEC细胞，CCK-8法检测细胞存活率，计算其半数抑制浓度（IC50），确定最佳干预浓度。使用A549细胞培养基在缺氧条件下诱导血管新生模型，将HUVEC细胞分为对照组（Control）、模型组（Model）、800μg/·mL-1肺岩宁方组（FYN）、100μg/·mL-1贝伐珠单抗组（Bevacizumab，阳性对照）、800μg/·mL-1肺岩宁方+慢病毒载体组（FYN+vector）、800μg/·mL-1肺岩宁方+TC2N过表达组（FYN+TC2N），每组设置6个复孔。分别检测细胞增殖、迁移与侵袭，管腔生成实验评价血管形成，定量RTqRT-qPCR检测HIF-1α、TC2N基因水平，westernWesternblot法检测HIF-1α、TC2N、E-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达。结果肺岩宁方对HUVEC细胞的IC50为893.00μg/·mL-1；与对照组比较，模型组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、HIF-1α、TC2N基因及蛋白表达升高，E-cadherin表达降低（P＜0.05）；与模型组比较，肺岩宁方组与贝伐珠单抗组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、HIF-1α、TC2N基因及蛋白表达降低，E-cadherin表达升高（P＜0.05）；与肺岩宁方+慢病毒载体组比较，肺岩宁方+TC2N过表达组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、TC2N基因及蛋白表达升高，E-cadherin表达降低（P＜0.05）。结论肺岩宁方可通过抑制TC2N的表达，抑制HUVEC细胞增殖、迁移、侵袭与血管生成。

关键词：肺岩宁方；串联C2结构域核蛋白；人脐静脉内皮细胞；增殖；迁移；管腔形成

中图分类号：256.1文献标识码：AR285.5

InfluencesofFeiyanningformulainhibitingFormulaInhibitingtheexpressionExpressionofTC2Nontheproliferation,migration,invasionProliferation,Migration,InvasionandlumenformationLumenFormationofHUVECcellsinducedCellsInducedbylungcancercellculturemediumunderhypoxia*LungCancerCellCultureMediumUnderHypoxia

[WangWei,XuZhenye,DengHaibin,MaYue,WangZhongqi,WangLifang

（LonghuaHospitalShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai200032,China）

Abstract]:ObjectiveToinvestigatetheinfluencesofFeiyanningformula(FYN)ontheproliferation,migration,invasionandlumenformationofhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)inducedbylungcancercellculturemediumunderhypoxia.MethodsHUVECcellsweret