缺氧条件下肺岩宁方抑制TC2N的表达对肺癌细胞培养基诱导.doc

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缺氧条件下肺岩宁方抑制TC2N的表达对肺癌细胞培养基诱导的HUVEC细胞增殖、迁移侵袭和管腔形成的影响

王薇,徐振晔,邓海滨,马玥,王中奇,王立芳收稿日期:2022-07-30修回日期:

收稿日期:2022-07-30

修回日期:2023-02-06

基金项目:上海市教育委员会科研创新计划重大项目(2017-01-07-00-10-E00064):源于精气理论的肺岩宁方抗肺癌生长与转移作用机制的研究,负责人:邓海滨。

通讯作者:王立芳,博士,主任医师,硕士研究生导师,主要研究方向:中医药防治恶性肿瘤。

(上海中医药大学附属龙华医院上海200032)

摘要:目的探讨缺氧条件下肺岩宁方(FYN)对肺癌细胞培养基诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移侵袭和管腔形成的影响。方法使用不同浓度的肺岩宁方(200~-6400μg/·mL-1)处理HUVEC细胞,CCK-8法检测细胞存活率,计算其半数抑制浓度(IC50),确定最佳干预浓度。使用A549细胞培养基在缺氧条件下诱导血管新生模型,将HUVEC细胞分为对照组(Control)、模型组(Model)、800μg/·mL-1肺岩宁方组(FYN)、100μg/·mL-1贝伐珠单抗组(Bevacizumab,阳性对照)、800μg/·mL-1肺岩宁方+慢病毒载体组(FYN+vector)、800μg/·mL-1肺岩宁方+TC2N过表达组(FYN+TC2N),每组设置6个复孔。分别检测细胞增殖、迁移与侵袭,管腔生成实验评价血管形成,定量RTqRT-qPCR检测HIF-1α、TC2N基因水平,westernWesternblot法检测HIF-1α、TC2N、E-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达。结果肺岩宁方对HUVEC细胞的IC50为893.00μg/·mL-1;与对照组比较,模型组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、HIF-1α、TC2N基因及蛋白表达升高,E-cadherin表达降低(P<0.05);与模型组比较,肺岩宁方组与贝伐珠单抗组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、HIF-1α、TC2N基因及蛋白表达降低,E-cadherin表达升高(P<0.05);与肺岩宁方+慢病毒载体组比较,肺岩宁方+TC2N过表达组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、TC2N基因及蛋白表达升高,E-cadherin表达降低(P<0.05)。结论肺岩宁方可通过抑制TC2N的表达,抑制HUVEC细胞增殖、迁移、侵袭与血管生成。

关键词:肺岩宁方;串联C2结构域核蛋白;人脐静脉内皮细胞;增殖;迁移;管腔形成

中图分类号:256.1文献标识码:AR285.5

InfluencesofFeiyanningformulainhibitingFormulaInhibitingtheexpressionExpressionofTC2Nontheproliferation,migration,invasionProliferation,Migration,InvasionandlumenformationLumenFormationofHUVECcellsinducedCellsInducedbylungcancercellculturemediumunderhypoxia*LungCancerCellCultureMediumUnderHypoxia

[WangWei,XuZhenye,DengHaibin,MaYue,WangZhongqi,WangLifang

(LonghuaHospitalShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai200032,China)

Abstract]:ObjectiveToinvestigatetheinfluencesofFeiyanningformula(FYN)ontheproliferation,migration,invasionandlumenformationofhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)inducedbylungcancercellculturemediumunderhypoxia.MethodsHUVECcellsweret

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