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从胡萝卜中提取色素的实验

前言

色素分天然色素和合成色素两大类，天然色素的应用有着悠久的历史，我国古代就有使用天然色素作纺织品染料、米饭、酿酒、化妆品等色料的记载。自从1856年英国人帕金合成出第一种人工色素—苯胺紫之后，合成色素因其色泽鲜艳、着色力强、性质稳定且价格便宜等特点，在人们的生活中就开始扮演着非常重要的角色。随着毒理学和分析化学的不断发展，人类逐渐认识到多数合成色素品种对人体有较为严重的毒性和致畸、致癌性，世界各国严格限制使用尚未弄清其安全性的合成色素品种，不少合成色素相继从各国许可使用的名单中删除。因而，现在利用无毒无害的天然物质提取食用、化妆品和医用色素，成为一种新的

发展趋势。

第一部分：天然色素

天然色素来自天然物质，现今主要由植物组织中提取，也包括来自动物和微生物的一些色素。天然色素具有安全、健康的特点，许多还具有一定的营养价值和药理功能。

天然色素的提取

天然色素的生产和获得主要有三条途径：一是直接提取；二是人工合成；三是利用生物技术生产[1]。目前绝大多数品种的天然色素是采用直接提取方法生产的。色素的提取主要有下列方法：溶剂提取法、萃取法、酶法、压榨法、粉碎法、组织培养法、微生物发酵法及人工合成法等，下面仅介绍常用的溶剂提法。

溶剂提取法

溶剂提取法是目前从动植物中提取色素的一种普遍常用的方法。溶剂提取法包括浸渍法、渗漉法、煎煮法和回流提取法。以水为溶剂提取天然色素可用浸渍法和煎煮法，前者适用于有效成分能溶于水，对湿、热稳定且不易挥发的原料用有机溶剂提取可采用回流提取法。提取高粱红色素是用0.1％的盐酸水溶液浸泡2h，除去杂质和杂色后，再用7％的乙醇水溶液在40℃下浸提，然后过滤、浓缩、干燥而得[2]。利用有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等提取姜黄中的姜黄色素。将虾壳用盐酸浸泡24h后过滤，滤渣用95％乙醇浸泡，提取液经蒸馏后得到浓缩的粗制虾青素提取物[4]。相对而言，有机溶剂提取法萃取剂便宜，设备简单，操作步骤简单易行，提取率较高，但用其提取的某些产品的质量较差，纯度较低，有异味或溶剂残留，影响产品的应用范围。

第二部分：从胡萝卜中提取色素的实验

1.实验目的

掌握从胡萝卜中提取分离胡萝卜素的原理和方法；

学会用色谱柱和纸色谱的实验操作；

学习并掌握柱色谱法的装柱操作。

实验原理

胡萝卜是营养价值很高的蔬菜，其胡萝卜素含量丰富，胡萝卜素与VA的性质很相似，存在于有色植物中，有α、β和γ等几种异构体。其中，以β胡萝卜素的生理作用最好，可

在动物的小肠、肝脏中转化成V，，所以也称VA元。在胡萝卜育种中，胡萝卜素的含量是一项重要指标。近年来，由于β胡萝卜素在防癌、抗癌方面的显著作用，使得胡萝卜素的研究更趋重要。β—胡萝卜素大都难溶于水，易溶于极性或非极性的有机溶剂，分子式C40H56.分子量536.85，熔点184℃，是不饱和碳氢化合物，难溶于甲、乙醇，可溶于乙醚、石油醚、丙酮等有机溶剂。目前，对植物性食品中的胡萝卜素含量的测定，可以用生物学鉴定法、溶剂分配法和层析法。

本实验通过柱色谱法，薄层色谱法提取胡萝卜中的胡萝卜素并进行鉴定。

柱色谱法原理：柱层析是化合物在液相和固相之间的分配，属于固液吸附层析，在一般柱色谱装置中，柱内装有“活性”固体（固定相）如氧化铝或硅胶等，液体样品从柱顶加入，流经吸附柱时即被吸附在柱的上端，然后从柱顶加入洗脱溶剂冲洗，由于固定相对各组分吸附能力不同，以不同速度沿柱下移，形成若干色带。再用溶剂洗脱，吸附能力最弱的部分随溶剂首先流出，分别收集各组分，再逐个鉴定，若各组分是有色的物质，则在柱上可以直接看到色带。

薄层色谱法原理：薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。在玻璃板上均匀的铺上一薄层吸附剂，制成薄层板，用毛细管将样品溶液点在起始处，将此薄层板置于盛有溶剂的容器中，待溶液到达前沿后取出，晾干，显色，测定色斑的位置。

仪器与试剂

仪器：色谱柱、滤纸、玻璃棒、毛细管、50mL烧杯、烘箱、250mL广口瓶

试剂：新鲜胡萝卜5g、丙酮30mL、石油醚20mL、丁醇-水、乙醇、无水硫酸钠、羧甲基纤维素钠水溶液、层析用硅胶（80～100目）40g、1：9丙酮-石油醚

图b薄层色谱装置 图c柱色谱装置

实验操作

胡萝卜素石油醚溶液的制备

称取10g新鲜胡萝卜，捣碎，置于50mL的三角烧瓶中，重复萃取2次，每次用10mL.丙酮。最后用石油醚萃取固体2次，每次用10mL。把石油醚溶液加到丙酮溶液里面中。在分液漏斗中将混合物与50mL饱和氯化钠溶液振荡，分出有机层，用蒸馏水洗涤2次，每次50m