乳腺癌中miR-155靶标的双荧光素酶报告法验证的开题报告.docxVIP

乳腺癌中miR-155靶标的双荧光素酶报告法验证的开题报告

一、研究背景

乳腺癌谓一种常见的肿瘤疾病，也是女性的主要健康问题之一，乳腺癌的发生往往伴随着许多不适症状，如乳房肿胀、疼痛、局部皮温升高等。在乳腺癌的早期筛查中，往往会使用miRNA的检测方法，因此进行miRNA的进一步研究对于乳腺癌治疗和诊断具有重要意义。

miRNA是一种长约22nt的小RNA，它参与调节细胞基因表达和功能，对于肿瘤的生长和扩散具有重要作用，因此被认为是乳腺癌治疗和诊断的重要依据之一。miR-155是一种与乳腺癌相关的miRNA，它被证明可以促进肿瘤细胞的增殖和浸润，并且可以调节细胞周期进程和凋亡。

本研究将使用双荧光素酶报告法对miR-155的靶标进行验证，以确定miR-155在乳腺癌治疗和诊断中的重要性。

二、研究目的

1.确定miR-155的靶标在乳腺癌细胞中的表达情况；

2.验证miR-155对其靶标的调节作用；

3.利用双荧光素酶报告法研究miR-155在乳腺癌中的重要性。

三、研究方法

1.细胞培养：人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231将在DMEM培养基中进行培养，并添加10%的胎牛血清。

2.质粒构建：将miR-155的靶标序列克隆进质粒中，同时构建miR-155的mimic和抑制物质。

3.转染实验：将质粒转染入MCF-7和MDA-MB-231细胞中，并使用qPCR和Westernblot检测miR-155的靶标表达量的变化。

4.双荧光素酶报告法：构建miR-155的靶标的双荧光素酶报告系统，以检测miR-155对其靶标调控的作用。

四、研究意义

本研究将为乳腺癌治疗和诊断提供新的方法和思路，对miRNA的研究和开发具有重要意义。同时，本研究还可以为其他肿瘤的miRNA研究提供借鉴和启示。