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实验材料
玉米(2n=20)花药、蚕豆(2n=12)花药、小麦(2n=42)花药、大葱(2n=16)花药、洋葱(2n=16)花药、番茄(2n=24)花药。
实验器具和药品器具显微镜、镊子、解剖针、盖玻片、载玻片、大培养皿、酒精灯、吸水纸。药品无水乙醇、冰醋酸、醋酸洋红染液、石蜡、二甲苯、固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、加拿大树胶、正丁醇或叔丁醇。第31页,共35页,2024年2月25日,星期天实验步骤
1.取材在一朵花的减数分裂的全过程中能观察染色体的时间是很短的,一般在终变期、中期I、后期I。因此,适时取材是是观察花粉母细胞减数分裂的关键步骤,不同材料、不同地区或季节的取材适期略有差异。(1)玉米雄穗北方的玉米5月份取材,时间为上午8:30为好,夏玉米一般在7月份取材,以上午7:00-8:00为好,在玉米雌穗未抽出前的7-10d手摸上部(喇叭口下部)有松软感觉,表明雄花序即将抽出。用刀在顶叶近喇叭口处纵向划一刀,切开长10-15cm,剥出雄花序,顶端花药长3-5mm,花药尚未变黄时取材为适期。将采集的雄穗浸入卡诺氏固定液中固定12-24h后,用95%酒精清洗净醋酸气味后,保存于70%酒精中置冰箱保存备用。第32页,共35页,2024年2月25日,星期天2.?小麦幼穗在小麦抽穗前10-15天,当旗叶与下一叶片的叶枕相距1—4cm、幼穗长约4cm时,各不同部位小穗第1-2朵小花的花药表现为黄绿色时,一般正是处于减数分裂时期。采集的小穗按上述玉米雄穗的固定方法进行固定处理。3.?蚕豆花蕾在早春(3-4月)蚕豆现蕾后,于上午8-10时,摘取长约lmm左右的花蕾,固定、保存。4.?大葱花序待3、4月份,大葱花序长到枣一样大时,颜色呈绿色(转黄时已晚),采摘花序固定,制片时,取1个小花,挑出花药,用醋酸洋红染色法压片观察。第33页,共35页,2024年2月25日,星期天2.制片取1-3枚花药放在洁净的载玻片上,用清洁刀片压在花药上向一端抹去,涂成薄层,然后滴1滴1%醋酸洋红染色液(或苏木精染色液),也可在花药上滴上染色液。然后用镊子把花药镊碎,去掉肉眼见得到的残渣,数分钟后盖上盖玻片,包被吸水纸,用大姆指匀力压片,或用铅笔的橡皮头垂直轻敲。为了加深染色,可把载玻片平放在酒精灯火焰上来回摆动几次,使之略作加热。第34页,共35页,2024年2月25日,星期天3.镜检先在低倍镜下寻找花粉母细胞,一般花粉母细胞较大、圆形或扁圆形,细胞核大、着色较浅。而一些形状较小,整齐一致着色较深的细胞是药壁体细胞,一些形状处于中间略呈扇形的细胞是从四分体脱开后的小孢子或幼小花粉粒。如形状较大,内部较透明并具有明显外壳的细胞则是成熟的花粉粒。观察到有一定分裂相的花粉母细胞后,用高倍镜观察减数分裂各时期染色体的行为和特征。第35页,共35页,2024年2月25日,星期天关于实验二植物减数分裂及玉米花母细胞涂片观察减数分裂的特点减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂,仅在配子形成过程中发生。减数分裂的特点是:连续进行两次分裂,而染色体只复制一次,结果形成4个子核,每个子核只含单倍体的染色体,即染色体数减少一半,所以叫做减少分裂。另外一个特点是前期特别长,而且形态和行为变化复杂,包括同源染色体的配对、交换与分离等。第2页,共35页,2024年2月25日,星期天减数分裂在遗传上具有两个重要的生物学意义:1、性母细胞(2n)经过减数分裂形成染色体数减半的配子(n),经过受精作用雌雄配子结合形成合子,染色体数恢复(2n),这样在物种延续的过程中确保了染色体数目的恒定,从而使物种在遗传上具有相对的稳定性。2、在减数分裂过程中包含有同源染色体的配对、交换、分离和非同源染色体的自由组合,这些都是遗传学分离、自由组合和连锁互换规律的细胞学基础,同源染色体的交换和非同源染色体的自由组合所产生的遗传重组,又是生物变异和进化的重要遗传基础。第3页,共35页,2024年2月25日,星期天植物花粉形成过程在植物花粉形成过程中,花药内的一些细胞分化成小孢子母细胞(2n),每个小孢子母细胞进行2次连续的细胞分裂(第一次减数分裂和第二次减数分裂)。每一个小孢子母细胞产生4个子细胞,每个子细胞就是1个小孢子。小孢子内的染色体数目是体细胞的一半(图2-1)。图2-1减数分裂染色体行为示意图第4页,共35页,2024年2月25日,星期天动物的有性生殖过程中,也有一个由双倍体到单倍体的减数过程,动物的精巢分化出精母细胞,精母细胞减数分裂形成单倍体的精子(图2-2)第5页,共35页,2024年2月25日,星期天动物减数分
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