miR-199a在大鼠脑缺血耐受过程中的表达和作用的开题报告.docxVIP

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miR-199a在大鼠脑缺血耐受过程中的表达和作用的开题报告

一、研究背景和意义

缺血性脑卒中是严重的脑血管疾病,其病理生理机制复杂,常常导致患者死亡或致残。目前,脑保护剂的研究和开发成为缓解脑卒中损伤的有效手段之一。越来越多的研究表明,microRNA(miRNA)在缺血性脑损伤发生和恢复过程中发挥着重要的调控作用。其中,miR-199a在脑卒中发生的过程中表达水平明显升高。然而,其作用机制还不明确。因此,对miR-199a在脑缺血耐受中的作用进行探究,有助于揭示脑卒中的发病机制和提高相应的治疗效果。

二、研究内容和方法

本研究旨在探究miR-199a在大鼠脑缺血耐受过程中的表达和作用。具体方法如下:

1.大鼠脑缺血模型的建立。选取成年雄性SD大鼠,麻醉后在中线切口处开颅,暴露出大脑血管供血区。使用血管夹将大脑中动脉夹住并用热切割切断,再于颈部将胸锁乳突肌分离,缝合伤口并单独饲养。

2.miR-199a的测定。将大鼠脑组织分离、裂解并提取总RNA。然后进行miR-199a的检测,采用实时荧光定量PCR技术。

3.细胞培养和细胞转染。选择原代培养的大脑神经元,采用MirVana?miRNAMimic(AppliedBiosystems)进行细胞转染,再进行细胞增殖、凋亡等指标的检测。

4.Westernblotting。采用Westernblotting检测miR-199a对相关信号通路和蛋白质的调节作用。

三、预期结果

预计通过上述实验,可以得到以下结果:

1.miR-199a在缺血性脑卒中发生的过程中表达水平显著升高。

2.miR-199a对大脑神经元的增殖和凋亡具有明显的调控作用。

3.miR-199a通过调节特定的信号通路和蛋白质的表达,从而发挥其相应的功能。

四、前瞻性分析

本研究将有助于深入探究miR-199a在缺血性脑卒中中的作用机制,为相关脑卒中治疗方法的发展提供科学依据。此外,研究结果也有望为其他相关疾病的发病机理研究提供新的思路和方法。

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