实验三网织红细胞计数血沉测定.ppt

关于实验三网织红细胞计数血沉测定一、网织红细胞计数目的掌握网织红细胞（Ret)试管法计数的原理及操作方法。原理网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体及核糖核酸等嗜碱性物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后，呈蓝色网状或点状结构，可与成熟红细胞相区别。第2页,共17页，2024年2月25日，星期天器材显微镜、试管、吸管、玻片、推片、香柏油、擦镜纸、擦镜液试剂新亚甲蓝标本新鲜全血第3页,共17页，2024年2月25日，星期天操作步骤1.加染液将Ret染液2滴加至小试管中，做好标记。2.加血在已加入染液的小试管内注入新鲜全血2滴，立即混匀。3.染色室温下染色10-15min。4.涂片制备取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥5.观察低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好、背景清晰的部位进行计数。6.计数常规法：在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞。7.计算Ret百分数=（1000个RBC中的Ret数/1000）×100%8.结果报告网织红细胞百分数：X.X%第4页,共17页，2024年2月25日，星期天血涂片制备推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。一张满意的血涂片应厚薄均匀头体尾涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B123第5页,共17页，2024年2月25日，星期天参考区间成人、儿童：0.5%-1.5%新生儿：2.0%-6.0%第6页,共17页，2024年2月25日，星期天注意事项1.试剂准备推荐使用新亚甲蓝染液，试剂应定期配制，用前过滤。2.染色染液与血液比以1:1为宜,染色时间不能过短。试剂用后及时盖好盖子，以免挥发。3.标本应及时染色，及时测定。4.计数选择红细胞分布均匀，网织红细胞着色好的、背景清晰的部位计数。应兼顾血片边缘和尾部。第7页,共17页，2024年2月25日，星期天目的掌握魏氏法测定血沉的原理及方法。原理将一定量的枸橼酸钠抗凝全血置于魏氏血沉管中，直立于血沉架上，由于红细胞比重大于血浆，克服血浆阻力而下沉，1h后读取上层血浆高度的毫米数，即为红细胞沉降率。器材魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管）试剂109mmol/L枸橼酸钠溶液。标本外周血。二、血液沉降率测定（魏氏法）第8页,共17页，2024年2月25日，星期天1.采血采静脉血1.6ml加入含0.4ml109mmol/L枸橼酸钠溶液抗凝剂的采血管中（即采血量到采血管2ml刻度线处），混匀。2.吸血混匀血吸入血沉管内至刻度“0”处，拭去管外残余血。3.立血沉管将血沉管直立于血沉架上。4.读数1h末准确读取红细胞下沉后露出的血浆高度。5.报告方式XXmm/h操作步骤第9页,共17页，2024年2月25日，星期天参考值＜50岁：男性<15mm/h女性<20mm/h＞50岁：男性<20mm/h女性<30mm/h＞85岁：男性<30mm/h女性<42mm/h儿童:<10mm/h二、血液沉降率测定（魏氏法）第10页,共17页，2024年2月25日，星期天注意事项1.严格控制采血量，使抗凝剂与血液比例为1：4。2.血沉管应垂直放置，不得倾斜。3.测量时，血沉架应避免直接光照、移动和振动。4.本实验最适宜温度为18～25℃，并要求在采血后2h内完成。5.红细胞沉降率在1h沉降过程中，并不是均衡等速度的沉降，绝不可以只观察30min沉降率，将结果乘以2作为1h血沉结果。第11页,共17页，2024年2月25日，星期天二、血液沉降率测定（自动血沉仪法）第12页,共17页，2024年2月25日，星期天白细胞计数一、目的掌握显微镜白细胞计数的方法。二、原理用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数。第13页,共17页，2024年2月25日，星期天三、器材显微镜、改良计数板、血盖片、试管、微量吸管、加样枪、乳胶吸头、纱布四、试剂白细胞稀释液五、标本EDT