外源化学物的特殊毒性.ppt

—代生殖毒性试验：是指亲代(F0)动物直接染毒受试物，仔一代(F1)在宫内和哺乳期接触受试物，其交配仅在F0代间进行，主要评价受试物对F0代青春期前后和成年动物亚慢性暴露的影响；两代(多代)生殖毒性试验：是指仔代（F1和F2)从怀孕到出生前的宫内持续暴露和断奶前的持续暴露，即F0代直接染毒受试物，F1代既有直接接触，也有经母体的间接接触，仔二代(F2)在官内和哺乳期接触受试物，其交配在F0代间和F1代间进行，主要评价从染毒到发育全过程受试物对生殖功能的影响。第21页,共39页，2024年2月25日，星期天1、发情周期的观察2、排卵的观察3、雌性激素检测4、病理组织学检查（三）其他辅助实验第22页,共39页，2024年2月25日，星期天致畸试验致畸作用(teratogenicity)系在外源化学物对胚胎或胎儿发育过程的干扰作用下，造成胎儿在出生时，某种器官表现形态结构异常的过程。能诱发致畸作用的外源化学物称致畸物或致畸剂(teratogen)。第23页,共39页，2024年2月25日，星期天一、动物致畸试验（一）基本原理：妊娠母体接触某些具有致畸作用的化学物质，对于处在器官形成期的胚胎发育可产生不良影响，使胎仔形态结构发生缺陷而呈现畸形。因此，可以通过观察妊娠母体在敏感期接触受试物后胚胎及胎仔的发育状况来评价某种化学物质有无致畸作用。第24页,共39页，2024年2月25日，星期天（二）基本方法1.动物选择2.动物交配处理3.剂量分组4.孕鼠状况观察5.动物剖检6.胎仔检查第25页,共39页，2024年2月25日，星期天1.动物选择原则上应选择动物体内代谢途径与人类似，胎盘结构也基本与人相近，妊娠期短而一致，产仔数多，而且自发畸形率较低的实验动物，为此多选用大鼠或小鼠。大鼠首选原因：对外源化学物代谢过程基本与人相似。受孕率高，产仔多。胎仔大小适中，易于观察。第26页,共39页，2024年2月25日，星期天2.动物交配处理健康成年未曾孕产的大鼠，体重200~250g，小鼠20~25g。雌雄动物2:1比例于晚上合笼，次日早晨对雌鼠阴道涂片检查，查见精子或发现阴栓者揭示已交配过，定为孕鼠，以这一天作为妊娠第0天计算妊娠日数。将查出的孕鼠按随机区组法分组，每组10~20只。第27页,共39页，2024年2月25日，星期天3.剂量分组一般高剂量组可选雌鼠LD50的1／3~1／5，低剂量组取1／30~1／50LD50的剂量；也可以亚慢性毒性实验中的最大无作用剂量为高剂量，以其1／30为低剂量。染毒：在雌鼠妊娠的第7~15天染毒，每日1次。染毒途径采用灌胃。第28页,共39页，2024年2月25日，星期天4.孕鼠状况观察在受试期间内应密切观察孕鼠的一般状况，每3天称量体重1次，通过体重的增减反映出受试物对孕鼠及胚胎的毒性程度。5.动物剖检应在预期分娩的前一天处死母鼠进行检查。剖检前要称量交记录母鼠最终体重。做大体观察并记录黄体数、活胎数及吸收胎数。6.胎仔检查活胎数、晚期死胎数、早期死胎数、吸收胎数及各种胎仔的特征。逐一记录胎仔外观所见，对活胎仔要测量其体重、体长和尾长。第29页,共39页，2024年2月25日，星期天第30页,共39页，2024年2月25日，星期天（三）结果判定1.母鼠妊娠期体重变化。2.平均着床数（％）＝3.平均活胎率=4.着床后死亡率（％）＝5.活胎仔平均体重、体长、尾长。6.畸形（外观、内脏及骨骼）总数。7.畸胎出现率（％）＝8.活胎仔畸形率（％）＝9.母体畸胎率（％）＝第31页,共39页，2024年2月25日，星期天二、体外致畸作用试验1.大鼠全胚培养(wholeembryoculture)2.器官培养(organculture)3.胚胎细胞微团培养(micmmassculture)4.水螅培养(hydraattenuataculture)致畸指数：母体LD50与胎仔最小致畸作用剂量之比，这一比值愈大，致畸作用愈强，一般认为比值10以下者，不具致畸作用，10－100具致畸作用，100以上致畸作用强烈。第