固相膜免疫技术.ppt

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感谢大家观看第63页,共63页,2024年2月25日,星期天双抗体夹心法测抗原胶体金免疫层析试验第31页,共63页,2024年2月25日,星期天ICA——间接法测抗体胶体金免疫层析试验第32页,共63页,2024年2月25日,星期天第33页,共63页,2024年2月25日,星期天IFA与ICA的比较IFAICA试剂形式渗滤装置及附加试剂试剂条试剂保存4~8℃6个月室温一年操作步骤3~51观察时间3min3~20min阳性反应颜色浓度操作结束颜色不变颜色逐渐加深第34页,共63页,2024年2月25日,星期天第35页,共63页,2024年2月25日,星期天GIFA技术的发展(间接法测抗体)阳性阴性固相膜固相抗原待测抗体金标记抗人IgG抗体人IgG固相抗人IgG抗体快速检测(渗滤法)原理图第36页,共63页,2024年2月25日,星期天ICA技术的发展1990年ABBOTT公司胶体硒标记ICAUnipath公司CLEARVIEW立明衣原体彩色胶乳标记ICAROCHECardiacReaderTnT定量0.1~3ng/ml合成TnT质控点第37页,共63页,2024年2月25日,星期天IFA肌红蛋白双孔法S:测定孔C:定量质控100μg/LIFA微量白蛋白单孔法T:测定孔C1:定量质控30mg/LC2:定量质控200mg/L结果判定:(-)<30(+)30~100、(++)100~200(+++)>200mg/LICA甲胎蛋白(AFP)参考值:30μg/L肝癌诊断值:>400μg/L结果判定:(-)<30(+)30~200(++)200~400(+++)>400μg/LSCTC2C1测定线对照线半定量测定第38页,共63页,2024年2月25日,星期天金免疫测定方法特点试验所用试剂全部为干试剂,多个试剂被组合在一个约6mm×70mm的塑料板条上,成为一单一试剂条。1.吸水材料2.免疫金复合物干片(下),硝酸纤维素膜(上)T:硝酸纤维素膜条包被特异抗体,R:参照区,包被有抗小鼠IgG。第39页,共63页,2024年2月25日,星期天金免疫测定方法评价简便、快速、单份测定,立等结果,除试剂外无需任何仪器,且试剂稳定,适合于急诊检验,但不能定量。(pointofcaretest,POCT)”第40页,共63页,2024年2月25日,星期天金免疫测定应用1.临床应用:定性分析,主要检测正常体液中不存在的生物活性物质,以及正常情况下体液中含量很低而在某些疾病中升高的生物活性物质。(1)传染病:?病毒相应抗原、抗体;性病病原体;细菌;寄生虫。(2)激素:?生殖标志物,如诊断早早孕HCG、检测排卵的促黄体生成素、促卵泡激素(FSH)等。第41页,共63页,2024年2月25日,星期天金免疫测定应用(3)心血管病:?急性心肌梗死的标志物:肌酸激酶的同工酶CK-MB,肌红蛋白,肌钙蛋白-T及脂肪酸结合蛋白质(PABP)等;与心血管疾病有重要关系的D-二聚体(D-dimer)(4)肿瘤:肿瘤标志物如前列腺特异抗原(PSA),AFP,CEA,CA125及CA15-3,以及对肠道肿瘤筛查有重要意义的大便潜血免疫检测(FOB)等(5)自身免疫病:?抗双链DNA抗体和诊断甲状腺自身免疫病的甲状腺过氧化物酶(TPO)抗体

?????第42页,共63页,2024年2月25日,星期天金免疫测定应用(6)毒品?检测:尿液中的可卡因、大麻、吗啡、海洛因、苯丙胺等。国外报道有可同时测7种毒品的GICA。(7)其它?检测:C-反应蛋白,半定量检测血清α-脂蛋白。2.非临床应用:?可用于食品检测,环境污染,生物沾染,还可用于生物战剂的快速检测,兽医学及法医学等方面检测。

第43页,共63页,2024年2月25日,星期天金免疫测定的重点和展望临床应用的重点应放在

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