第34章 DNA的复制和修复-课件.pptVIP

第34章DNA的复制和修复;DNA复制

DNA修复合成

反转录

DNA的体外复制：分子克隆（PCR）。;一、DNA复制的起点和复制方式;2、复制往往具有一定的起点;大肠杆菌的复制起点：OriC;研究大肠杆菌DNA复制时发现，DNA复制的发动与DNA甲基化和细菌质膜有关。

大肠杆菌复制起点叫oriC，由245bp构成，在oriC中有11个含4bp的回文序列“GATC”，Dam甲基化酶可使该序列中的腺嘌呤第6位N甲基化。;DNA的复制调控发生在起始阶段;DNA复制起点的特点;定位复制起点的方法;;;;3.复制的类型和方式;复制的类型和方式;复制的方向判断;复制的类型和方式—D环复制;复制的类型和方式—滚环复制;复制的类型和方式—滚环复制;复制的类型和方式—滚环复制;复制的类型和方式—多复制叉复制;;;;;;;?单链DNA首先复制合成双链的复制型（单链DNA复制时，通常先宣传双链复制型，再进行半保留复制）;1.设计实验证明DNA是半保留复制

-2012大连理工大学生物化学

2.猪流感病毒HRN1是反转录病毒，试想出实验方案以阻止病毒在细胞内复制而不影响细胞内DNA正常复制。

一个同学想研究DNA复制过程用放射性磷来标记底物，他标记的磷是第三位的磷，问是否能够达到目的？-2012山东大学生物化学

3.简述MettewMeselson和FranklinStahl设计了一个什么样的实验,证实DNA的复制是半保留复制;;;;思考题;;;碱基切除修复;;;;思考题;思考题;三、DNA复制有关的酶及蛋白质因子;;思考题;53复制方向的证明;53复制方向的证明;53复制方向的证明;复制的方向;5`3`复制方向的原因;53复制方向的原因;2.大肠杆菌的DNA聚合酶;（1）.大肠杆菌的DNA聚合酶I;DNA聚合酶I的功能;DNA聚合酶I的特点;DNA的链终止法测序;DNA聚合酶I的特点;思考题;（2）.大肠杆菌的DNA聚合酶Ⅱ;(3).大肠杆菌的DNA聚合酶Ⅲ;DNA聚合酶Ⅲ全酶;大肠杆菌的三种DNA聚合酶小节;（4）大肠杆菌DNA聚合酶Ⅳ和Ⅴ.;3.DNA连接酶（DNAligase）;ThereactioncatalyzedbyDNAligase;ThereactioncatalyzedbyDNAligase;4.引物酶(primerase)（P419）;引物酶(primerase);引物酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合（DDRP）该酶以DNA为模板，聚合一段RNA短链引物(primer)，以提供自由的3’-OH，使子代DNA链能够开始聚合。

DNA复制为什么要用引物？（为什么DNA聚合酶要用引物，RNA聚合酶不需要引物？为什么引物为RNA?）

⑴从模板复制最初几个核酸时，碱基堆集力和氢键都较弱，易发生错配

⑵新复制的最初几个核苷酸，没有与模板形成稳定双链，DNA聚合酶的3，→5，校对功能难发挥作用。

前导链只需要一个引物，滞后链需要多个引物;5.DNA复制的拓扑异构性质;DNA复制的拓扑异构性质;TypeItopoisomerases;TypeItopoisomerases;ModelforTopoIIMechanism;Topoisomerasesasdrugtargets:;6.DNA解螺旋酶（解旋酶）;7.单链DNA结合蛋白;原核生物DNA复制起始的相关蛋白质;(一).DNA复制的起始;;DNA复制的起始;DNA复制的起始;引发体(primosome)与引物合成;引物;引发体沿着模板链5’→3’方向移动（与冈崎片段合成的方向正好相反，而与复制叉移动的方向相同），移到一定位置上即可引发RNA引物的合成;DNA的复制调控发生在起始阶段;2.复制的延伸;复制的延伸;DNA复制的过程-随后链;细菌领头链和随从链的延长差异;切口平移;后随链的模板在全酶上绕转180.形成一个小环;)

;3.E.coliDNA合成的终止;E.coliDNA合成的终止;思考题;思考题