3.1 重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版选择性必修3(1).pptx

第3章基因工程

第一节重组DNA技术的的基本操作工具

我国是棉花生产大国，但棉花植株常会受到棉铃虫的侵袭，使棉花产量减少1/3，甚至绝收。大量施用农药杀虫不仅提高了生产成本，还可能造成农产品和环境的污染。苏云金杆菌可以合成一种抗虫毒素——Bt毒蛋白，如何能培育出具有抗虫性的棉花新品种呢？杂交育种？诱变育种？可以实现吗？为什么？杂交育种：同种生物之间进行；诱变育种：在原有基因基础上发生基因突变，结果产生新基因——等位基因（不定向）基因工程育种：克服远缘杂交不亲和的障碍；定向改造生物性状。

毒死害虫毒蛋白基因棉花细胞苏云金杆菌与载体DNA拼接，导入毒蛋白抗虫棉的培育过程目的基因←→受体细胞→基因表达产物

1.概念：指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫重组DNA技术。一、基因工程的概念及解读①别名：②变异原理：③操作对象：④操作水平：⑥结果：重组DNA技术基因DNA分子水平基因重组赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品⑤基本过程：剪切→拼接→导入→表达⑦优点：克服远缘杂交不亲和障碍、定向改造生物性状例如：通过转基因技术，可以实现大肠杆菌生产人的胰岛素，在此实例中，目的基因是，受体细胞是：，目的基因的表达产物是：。人胰岛素基因大肠杆菌人胰岛素

1944年艾弗里等人证明了DNA可以在同种生物的不同个体之间转移。1950年埃特曼发明了一种测定氨基酸序列的方法。1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型。1958年梅塞尔森和斯塔尔用实验证明了DNA的半保留复制。1961年尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。1967年，科学家发现，在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力，并可以在细菌细胞间转移。1970年科学家在细菌中发现了第一个限制性内切核酸酶（简称限制酶）。20世纪70年代初，多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现。1972年，伯格成功构建了第一个体外重组DNA分子。2.基因工程的诞生和发展

×√√×√√思考1：为什么不同种生物的基因能拼接在一起？理论基础是什么？思考2：为什么外源基因在受体细胞内能够成功表达出相应的蛋白质呢？理论基础是什么？

复制转录翻译重组DNA逆转录复制蛋白质理论基础1.DNA的基本组成单位相同(都是四种脱氧核苷酸)2.都遵循碱基互补配对原则3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构理论基础1.基因是控制生物性状的结构与功能单位2.遗传信息传递都遵循中心法则3.生物界几乎共用一套遗传密码3.基因工程的理论基础（1）不同种生物的基因能拼接的理论基础（2）外源基因在受体细胞内能表达的理论基础RNA

思考3：培育转基因抗虫棉需要哪些关键步骤？关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌DNA中提取出来关键步骤二：抗虫基因与载体“缝合”关键步骤三：抗虫基因导入棉花细胞

二、重组DNA技术的基本工具（三）分子运输车---载体（一）分子手术刀---限制酶（二）分子缝合针---DNA连接酶“手术刀”“缝合针”“运输车”

识别特定核苷酸序列，断开磷酸二酯键——专一性（一）限制性内切核酸酶——“分子手术刀”1.简称：限制酶2.来源：原核生物（主）4.作用：ATCGTAGC5’3’5’3’磷酸二酯键EcoRⅠ5’…G-A-A-T-T-C…3’3’…C-T-T-A-A-G…5’3.种类：数千种（限制酶不是一种酶，而是一类酶）5.识别序列：大多数：6个少数：4个、8个或其他数量6.作用部位：特定部位的磷酸二酯键

大多数限制酶：识别序列由6个核苷酸组成，例如EcoRⅠ、SmaⅠ，少数限制酶：由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

GAATTCCTTAAG5’3’3’5’中心轴线GCTTAAAATTCG中心轴线两侧切开黏性末端EcoRⅠ（1）EcoRⅠ限制酶能特异性识别序列（5’→3’方向），在识别序列的中心轴线两侧，切割和之间的，切割后产生。GAATTCGA磷酸二酯键黏性末端7.作用结果：产生的DNA片段末端通常有两种形式——____________和_________