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MiR-143对肾癌细胞株A498增殖及凋亡影响的研究的开题报告

一、研究背景与意义

肾癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年上升。早期诊断和积极治疗对肾癌的治疗至关重要，但由于肾癌的高度异质性和多样性，传统治疗方法面临着挑战。

MiR-143是一种微小RNA，发现于人类基因组中，其在调节生长、凋亡、分化等生物学过程中发挥着重要作用。其中对于肾癌细胞的作用仍有待深入研究。

因此，本研究旨在探究MiR-143对肾癌细胞增殖与凋亡的影响，为肾癌治疗提供新的思路和理论依据。

二、研究方法

1.实验材料：

肾癌细胞株A498、正常人肾小管细胞、MiR-143siRNA、miRNAmimic

2.细胞培养：

将A498细胞和正常人肾小管细胞分别培养于DMEM培养基中，含10%胎牛血清，37°C下制备单细胞悬液。

3.Transfection实验

将上述培养好细胞分别接种于6孔板中，将需要检测的RNA溶液引入对应实验孔中，然后培养24h/48h并且进行相关实验。

4.筛选细胞凋亡指标(celldeath)

采用Annexin-V/PI双染法筛选细胞凋亡指标，并将结果通过流式细胞仪进行分析。

5.细胞增殖检测

利用CCK-8法检测细胞增殖情况，并测定MiR-143对肾癌细胞株增殖的影响。

6.Westernblot分析:

通过Westernblot法检测相关信号分子的表达水平，并分析MiR-143对其表达的影响。

三、预期结果

我们预期本研究能够通过细胞增殖实验和筛选细胞凋亡指标的流式细胞仪检测法，得出MiR-143对肾癌细胞株A498的增殖和凋亡作用，并且通过Westernblot法验证其信号分子表达水平是否受到MiR-143的影响。本研究结果对于探究肾癌治疗机制具有重要意义。