【生物】重组DNA技术的基本工具课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第三章基因工程;1944年;1982年，第一个基因工程药物-重组人胰岛素被批准上市。;分析：

人的胰岛素基因能通过拼接并在受体细胞大肠杆菌中表达出相同蛋白质（胰岛素）的理论基础：

（1）大肠杆菌和人的遗传物质都是。

（2）不同生物的DNA分子能够拼接在一起，原因是____________________________________________________________

（3）同一种基因在不同生物体内表达出来的蛋白质相同，因为：

_________________________________________________________

（4）遗传信息的传递都遵循。

(5)为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？;;番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。

DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。;到社会中去;资料卡;;EcoRI

(在G与A之间切割);DNA分子中不具备这种限制酶的识别切割序列，或者DNA分子被修饰（甲基化），使限制酶不能将其切开;两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来;T4DNA连接酶还可以把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率相对较低。;将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，形成重组DNA分子。;三、基因进入受体细胞的载体;（4）质粒作为载体所具备的条件;种类;(1)已知EcoRⅠ的识别序列和切点是—G↓AATTC—，BamHⅠ的识别序列和切点是—G↓GATCC—;(2)已知BamHⅠ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，Sau3AⅠ的识别序列和切点是—↓GATC—;(3)已知BamHⅠ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，Sau3AⅠ的识别序列和切点是—↓GATC—;用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，序列会明显（增多、减少、不变）。;DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？为什么？;名称;1.标记基因通常有:

①抗生素的抗性基因，如:抗氨苄青霉素基因(ampr)、抗四环素基因(tetr)

②荧光蛋白??因，如:绿色荧光蛋白基因(GFP)、红色荧光蛋白基因(RFP);2、筛选含有目的基因的细菌（2种抗性基因）;;做法：配制三种培养基，一种是普通培养基，第二种是加入氨苄青霉素的培养基，第三种是加入四环素的培养基。;

;请你根据图3-3中的相关信息找到两条片段上EcoRI的识别序列和切割位点。然后，用剪刀进行“切割”。待切割位点全部切开后，将从下面那条DNA链上切下的片段重组到上面那条DNA链的切口处，并用透明胶条将切口粘连起来。;AATTCGGCATAC…;用同种限制酶切割，容易出现质粒和目的基因自身环化。;使用一种限制酶进行切割，是否只会得到目的基因与载体结合的这一种重组DNA？;1.剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具”？;4.重组质粒的形成中，用何种酶处理目的基因和载体（质粒）？;1.实验思路：;不能选择哺乳动物成熟的红细胞，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体，几乎不含DNA（可以用鸡血细胞）。;;3.DNA的析出;4.DNA的鉴定;（5）方法步骤小结：;DNA的粗提取与鉴定视频;实验结果不明显的可能原因

①材料中的核物质没有充分释放出来，如研磨不充分或蒸馏水的量不够。

②加入酒精后摇动或搅拌时过猛，DNA被破坏。

③二苯胺最好现用现配，否则二苯胺变成浅蓝色，影响鉴定效果。;进一步探究（75页）

本实验只是对DNA进行了粗提取，请在阅资料，了解实验室提取纯度较高的DNA的一种方法，并与本实验中所使用的方法进行比较，总结两种方法的异同。;;一、概念检测

1.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是（）

A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键

B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键

C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键

D.只