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CYR1基因定点突变对面包酵母高温耐受性的影响研究开题报告
一、研究背景
随着全球气候变化和环境压力增加，高温对面包酵母的生长和发酵产生了越来越大的影响。因此，研究面包酵母的高温耐受机制，并在此基础上寻找提高其高温耐受能力的途径，对面包酵母的工业应用具有重要的意义。
二、研究内容
本研究旨在通过对CYR1基因进行定点突变，探究CYR1基因对面包酵母高温耐受性的影响，并进一步研究CYR1基因在面包酵母高温耐受过程中的作用机制。具体研究内容包括以下两个方面：
1.利用CRISPR/Cas9技术对CYR1基因进行定点突变，构建高温敏感和高温耐受突变株。
2.对高温敏感和高温耐受突变株的生长、发酵能力及相关代谢途径进行比较分析，探究CYR1基因在高温耐受性中的作用机制。
三、研究意义
1.对面包酵母高温耐受性机制的探究将为提高其工业应用价值提供重要的支撑。
2.研究结果可为面包酵母高温耐受性的调控及优化提供理论依据。
3.CYR1基因定点突变技术在面包酵母基因编辑研究中的应用，可以为其他酵母的基因编辑提供借鉴。
四、研究方法
1.利用CRISPR/Cas9技术对CYR1基因进行定点突变。
2.对突变株进行生长、发酵实验并测量相关代谢途径，如ATP含量、葡萄糖酵解率等。
3.利用基因芯片、PCR、Westernblot等技术对突变株的基因表达、蛋白质水平等进行分析。
五、研究预期结果
1.构建高温敏感和高温耐受突变株。
2.发现CYR1基因在面包酵母高温耐受性中的作用机制。
3.探究CYR1基因定点突变对面包酵母代谢途径的影响。
六、研究进度安排
1.文献调研和课题构思（已完成）
2.对CYR1基因进行定点突变并构建突变株（进行中）
3.对两种突变株进行生长和发酵实验，比较其代谢途径（待进行）
4.对突变株的基因表达和蛋白质水平进行分析（待进行）
七、参考文献
1.Peng,Z.,Huang,J.,Hu,Y.,Li,B.,Ouyang,Q.(2019).FunctionallyredundantGαandGβsubunitscontributetorobustnessofGPCRsignalinginyeast.ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,116(43),21553-21558.
2.Sarkar,P.,Srivastava,A.,Chakrabarti,A.,Mitra,A.(2019).GenomeminingandcharacterizationofanovelphospholipaseDwithcytochromeb5-likedomainfromSaccharomycescerevisiae.Biochimie,165,86-98.
3.Yang,T.,Huang,X.,Liao,Y.,Zhang,Y.,Su,Z.,Liu,Y.,...Chen,Y.(2020).ConstructionofanovelSaccharomycescerevisiaestrainforefficientutilizationofglucosefromJerusalemartichoketubers.Biotechnologyforbiofuels,13(1),1-15.
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