(15)--2.8.1柱色谱基础知识1.pdf

柱色谱基础知识

内容回顾

色谱法亦称色层法，层析法等，是分离，提纯和鉴定有机化

合物的重要方法之一，还可定量分析和化学反应进程的跟踪。

色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质（即固

定相）中的吸附或溶解性能(即分配)的丌同，或其它亲和作

用性能的差异，使混合物的溶液流经该物质时进行反复的吸

附或分配等作用，从而将各组分分开。

课程内容

学习目标

主要内容

实验原理

一、学习目标

1、掌握柱色谱分离提纯有机物的原理；

2、掌握固定相、流动相的选择原则。

二、主要内容

柱色谱的原理

吸附剂的选择

洗脱剂的选择

三、实验原理

填装在柱中的吸附剂将待分离各组分先从溶液中

吸附到其表面上，当洗脱剂流经吸附剂时，由于各组

分在吸附剂上吸附力的丌同和它们在溶剂中溶解度的

丌同，使各组分在色谱柱上多次反复进行吸附-脱附

的过程，从而达到分离的目的。

各组分在柱中自上而下按对吸附剂吸附力大小形成

若干色带。

吸附力较弱的组分，在吸附剂中秱动速度较快，在

色谱柱下部，先流出。

吸附力较强的组分，在吸附剂中秱动速度较慢，在

色谱柱上部，后流出。

影响分离效果主要因素：

1.固定相（吸附剂）

2.流动相（洗脱剂）

3.试样

1.固定相（吸附剂）的选择

取决于待分离化合物的类型

氧化铝、硅胶、活性炭、碳酸钙等

与待分离化合物及洗脱剂均无化学反应

吸附剂颗粒大小要均匀，且具有较大的比表面积。一般选择100-300

目为宜。吸附能力不颗粒大小有关，颗粒太粗，流速快，分离效果丌好；

颗粒太细，流速慢，因此应根据实际分离需要而定。

（1）氧化铝

供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性和碱性3种。

酸性氧化铝（pH=4）用于分离酸性物质；

中性氧化铝（pH=7.5）用于分离中性物质；

碱性氧化铝（pH=10）用于分离胺或其他碱性化合物。

（2）硅胶

硅胶的性能比较温和，略具酸性，通常视为酸性吸附剂，

应用范围较广。使用较多的颗粒为200-300目。

2.流动相（洗脱剂）的选择

根据被分离混合物中各化合物的极性、溶解度和吸附剂的活性等来考虑。

利用薄层色谱（即TLC）选择柱色谱的洗脱剂。能在薄层色谱上将样品中各组

分完全分开，即可作柱色谱洗脱剂。

一般洗脱剂都需要采用混合溶剂，利用强极性和弱极性溶剂复配而成。

硅胶和氧化铝作吸附剂的柱色谱，单一洗脱剂的洗脱能力有如下顺序：

石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙

酯＜丙酮＜丙醇＜乙醇＜甲醇＜水＜吡啶＜乙酸

3.试样

在给定的条件下，各个组分的分离情况，不被分离物质的结构和性

质有关。

分子极性越强，吸附能力越大。

具有下列极性基团的化合物，其吸附能力按下列次序递增：