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人Foxp3基因修饰的NKL/NK-92细胞系生物学特性研究的开题报告
题目:人Foxp3基因修饰的NKL/NK-92细胞系生物学特性研究
研究背景:
人天然杀伤细胞(NK细胞)是一类与防御病原体感染和癌症有关的免疫细胞,能够杀伤被感染细胞、肿瘤细胞、转移性细胞等。近年来,NK细胞在细胞免疫治疗方面备受关注,但其应用受到限制,主要原因是NK细胞在体内表现出有限的活性和存活能力。因此,对NK细胞的体内调控机制进行深入研究,探寻发现新型控制NK细胞功能和应用的方法具有广泛的理论意义和临床应用前景。
研究目的:
本研究旨在探究Foxp3基因对NKL/NK-92细胞系生物学特性的影响,为NK细胞的体内调控提供理论基础。
研究内容:
1.构建Foxp3基因修饰的NKL/NK-92细胞系
采用重组慢病毒载体、CRISPR-Cas9技术对NKL/NK-92细胞进行Foxp3基因修饰和筛选,获得Foxp3基因的高表达细胞系。
2.检测Foxp3对NKL/NK-92细胞生物学特性的影响
测定Foxp3基因表达水平,检测NKL/NK-92细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、细胞分化、细胞表面标记、细胞因子分泌等指标的变化,评估Foxp3基因对NKL/NK-92细胞系生物学特性的影响。
3.探究Foxp3基因调控NK细胞生物学特性的机制
采用RNA测序技术,检测对比Foxp3基因修饰和原始NKL/NK-92细胞系差异表达的基因及其关联生物通路,探究Foxp3基因调控NK细胞生物学特性的机制。
研究意义:
本研究将探究NK细胞中Foxp3基因的作用机制,为进一步探究NK细胞调控机制提供理论基础。同时,本研究为探寻新的治疗手段,提高NK细胞在免疫治疗中的效力提供参考,并为基因治疗技术的研究提供借鉴。
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