HY/T 151-2013海洋微藻中溶血毒素的检测　血细胞法.pdf

ICS07.060;13.060

Z17

中华人民共和国海洋行业标准

HY/T151—2013

海洋微藻中溶血毒素的检测血细胞法

Detectionofhemolytictoxinsinmarinemicroalgae—Erythrocytelysisassay

2013-04-25发布2013-05-01实施

国家海洋局发布

HY/T151—2013

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由国家海洋局南海环境监测中心提出。

本标准由全国海洋标准化技术委员会(SAC/TC283)归口。

本标准起草单位：国家海洋局南海环境监测中心、暨南大学。

本标准主要起草人：李秀芹、杨维东、黄楚光、徐志斌、高阳、彭颖慧、上官茂森、林端、方宏达、吴进孝、

董燕红、陈嘉辉、吴玲玲、曲念东、刘洁生。

I

HY/T151—2013

海洋微藻中溶血毒素的检测血细胞法

1范围

本标准规定了用血细胞法检测海洋微藻中溶血毒素活性的方法及技术要求。

本标准适用于自然海水中海洋微藻细胞中溶血毒素的检测，也适用于实验室培养的海洋微藻细胞

中溶血毒素的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB17378.3—2007海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输

HY/T069—2005赤潮监测技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

海洋微藻marinemicroalgae

海水中粒径大于2μm的浮游植物。

3.2

溶血毒素hemolytictoxins

一类主要由微藻产生能够导致机体红细胞及其他真核细胞裂解的糖脂类物质，其主要作用于敏感

细胞的细胞膜脂质部分。

3.3

溶血活性hemolyticactivity

溶血毒素溶解血细胞的效力。

3.4

溶血单位hemolyticunits

。

用来表述溶血毒素活性的量纲1个溶血单位相当于在1mL反应系统中(含柠檬酸缓冲液

0.15mL、0.5%的兔血红细胞0.80mL和溶血毒素粗提液0.05mL),在37℃水浴30min使红细胞溶

解50%时所需溶血毒素的量，相当于(1.30±0.39)μg洋地黄皂苷。

3.5

血细胞法erythrocytelysisassay

针对溶血毒素破坏、溶解血细胞的特性建立的一种检测方法，该方法以溶血单位为量纲来定量溶血

毒素的溶血活性。

3.6

赤潮水样redtidewater

微藻细胞浓度达到或超过HY/T069—2005规定的基准浓度的海水样品。

1

HY/T151—2013

3.7

非赤潮水样non-redtidewater

微藻细胞浓度未达到HY/T069—2005规定的基准浓度的海水样品。

4原理

利用氯仿、甲醇和水体积比为13:7:5的提取液萃取微藻细胞中的溶血毒素，经减压蒸馏浓缩后，

再以甲醇溶液溶解残留