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iPSCs定向分化为运动神经元的电生理特性研究的开题报告

引言

近年来，人类诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells，iPSCs）技术的出现，极大地提高了基础医学及临床医学领域的研究水平。iPSCs具有无限自我复制的能力及向各类细胞类型定向分化的潜力，为神经退行性疾病的治疗提出了全新的思路。

在神经退行性疾病中，神经元的丧失是导致患者出现肌张力障碍、肢体强直、肌肉萎缩、运动失调等表现的关键因素，而运动神经元在人体的运动控制中起着重要作用。因此，将人类iPSCs定向分化为运动神经元，研究其电生理特性对解答相关神经疾病的发病机制、寻找治疗方式，具有重要的临床应用前景。

本文旨在探讨iPSCs定向分化为运动神经元的电生理特性研究，并结合神经退行性疾病的研究进展，提出相关实验方案，以期为相关领域研究提供参考。

研究现状

iPSCs技术的发明为神经退行性疾病的研究提供了重要的平台。已有研究利用iPSCs从患者体内采集的细胞定向分化为运动神经元，并发现这些细胞表现出明显的疾病特征（如Amyotrophiclateralsclerosis，ALS患者运动神经元死亡的表现，Parkinson’sdisease，PD患者黑质神经元死亡），可供病理机制研究及药物筛选使用（Egawaetal.,2012;Reinhardtetal.,2013）。

目前有关iPSCs定向分化为运动神经元的电生理特性研究还处于发展的初期阶段，但已经有研究表明，人类iPSCs定向分化为运动神经元后，可以表现出阳性的电生理性质，如可逆性动作电位、重复发放和外出电位等（Sunetal.,2016）。这为研究运动神经元的电生理特性提供了基础，并为相关神经疾病的研究奠定了基础。

研究目的

本研究的主要目的是探究iPSCs定向分化为运动神经元的电生理特性，以此为基础为神经退行性疾病的发病机制及治疗提供有效手段。

具体研究内容

1.iPS细胞的培养及定向分化为运动神经元：选用能够通过治疗遗传性ALS和SPG4（假性麻痹性横纹肌营养不良）的基因突变的细胞，利用CRISPR/Cas9技术编辑Gen2.2和SPG8突变，将基因突变的细胞转化为iPSCs，并定向分化为运动神经元。

2.运动神经元的电生理特性检测：运用多通道系统，对定向分化后的运动神经元进行电生理检测，包括测量运动神经元的膜电位、漏电流、高钾离子激活的钾离子电流、电压依赖性钙离子电流等。

3.对运动神经元电生理特性进行分析：运用MATLAB等软件，对检测到的运动神经元的膜电位、漏电流、高钾离子激活的钾离子电流、电压依赖性钙离子电流等数据进行统计和分析。

4.与疾病模型对比和药物试验：将定向分化后的运动神经元与疾病相关的模型组织进行对比，包括ALS患者的运动神经元、PD患者的黑质神经元等，检测其电生理特性的差异性。同时，加入相关药物进行药物试验，检测药物对定向分化后的运动神经元的影响，探讨药物治疗神经退行性疾病原理。

结论

本研究的主要目的是探究iPSCs定向分化为运动神经元的电生理特性，相信这项研究将为相关领域提供重要的实验数据，并开拓了治疗神经退行性疾病的新思路。