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;目录;一、种质概念;二、种质资源保存的必要性;三、种质资源保存类型;三、种质资源保存类型;野外保存植物种质资源需要大量的土地和人力资源,成本高,且易遭受各种自然灾害的侵袭。
种子库只能保存正常型种子,对于顽拗型、脱水敏感的种子和有性繁殖困难的植物则无能为力,而且种子库仅能保存基因,而不能保存特定的基因型材料。
自1975年Henshaw和Morel首次提出离体保存(conservationinvitro)植物种质的策略以来,该项技术受到植物界的极度重视。
;;目录;一、种质资源超低温保存的原理;二、细胞冰冻结冰保护性脱水理论;二、溶液的玻璃化理论;提高超低温冷冻保存的措施
由于植物细胞含水量比动物细胞高,冰冻保存难度大,如果直接将保存材料放入液氮中,组织和细胞由于细胞内水分结冰,引起组织和细胞死亡,因而,超低温保存的植物材料必须借助于冷冻防护剂(cryoprotectant)。
冷冻防护剂防护机理:
在水溶液中能强烈地结合水分子,水合作用的结果使溶液的黏稠度增加。当温度下降时,溶液冰点下降,即冰的结晶中心增长速度下降,使水的固化程度减弱。因而对于降低培养基冰点和植物组织、细胞冰点起重要作用。
冷冻防护剂的使用提高了培养基渗透压,导致细胞的轻微质壁分离,相对提高了组织和细胞的抗寒力。
;常用的冷冻防护剂
渗透型冷冻防护剂:
多为小分子中性物质,在溶液中易结合水分子发生水合作用,使溶液粘性增加,弱化水的结晶过程,达到保护的目的。包括二甲亚砜(DMSO)、甘油、甘露醇、脯氨酸、乙二醇、丙二醇
非渗透型冰冻保护剂:
是聚合分子物质,能溶于水,但不能进入细胞,它使溶液呈过冷状态,从而起到保护作用。此类冰冻保护剂对快速、慢速冷却均有保护效果。
常见的:
聚乙烯吡咯烷酮(Polyvingylpyrollidone,PVP)
葡聚糖(Dextrane)
聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)
羟乙基淀粉(Hydroxyethylstarch,HES)
;;目录;一、种质资源的概念;二、种质资源工作的重要性;自然界的植物有30-50万种,它们是通过长期生物进化的产物。全世界有栽培作物2300种,食用作物占900多种,经济1000种,饲料绿肥400种。
;;??录;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;(2)贮藏保存
种子贮藏在
短期库10℃50%纸袋中可保存5年。
中期库0-5℃40-50%密闭容器内保存20年。
长期库-10--15℃〈35%真空包装中保存70年。;(2)贮藏保存
用试管保存植物的组织和细胞的培养物。用于无性繁殖作物,可用组织和细胞培养物。-196℃超低温条件下保存
常用的培养物有:愈伤组织、悬浮细胞、幼芽生长点、花粉、花药、体细胞、原生质体、幼胚等。
利用试管保存的优点:
①所需空间小
②可以解决常规方法不易保存的种质资源。
③繁殖时不受季节限制,繁殖速度快。
④培养物不带病虫害,便于种质交流。
;一、种质资源工作内容;种质资源的研究
种质资源研究的主要内容有:
①研究性状遗传变异特点。
②遗传潜力、选择可靠性、选择效果。
③与性状相关基因的研究。
④基因型与环境互作效应。;一、种质资源工作内容;一、种质资源工作内容;;目录;一、种质资源的离体保存;二、离体保存方法;二、离体保存方法;(一)低温保存
低温保存的基本特征是保存材料的定期继代培养,不断繁殖更新;
基本措施是控制保存材料所处的温度和光照。
延缓保存材料生长速度的另一项措施是改变培养基的成分,在培养基中添加生长延缓剂或生长抑制剂,如ABA(脱落酸)、CCC(矮壮素)、PP333(多效唑)、B9(比久)、MH(青鲜素)等。
种质库要定期检查,保持清洁,及时清除污染材料,并注意积累资料。
;(二)超低温保存
1.种质资源超低温保存的发展概况
20世纪70年,Nag和Street首先证明胡萝卜悬浮培养细胞在液氮中保存后能恢复生长。
植物超低温种质保存(cryopreservation)是指将植物的离体材料包括茎尖(芽)、分生组织、胚胎、花粉、愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等,经过一定的方法处理后在超低温(-196℃液氮)条件下进行保存的方法。
其中,茎尖、胚、幼苗等材料遗传性稳定、再生力强,对冷冻和解冻过程中所产生的斜坡忍受能力强;极端低温温度下,活细
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