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血清学检验技术概述;血清学反应的概念、类型;血清学反应的概念;血清学反应的类型;一级血清学试验;;血清学反应的一般特点;(一)特异性与交叉性;;;;;抗原与抗体最适比例与带现象;血清学反应的影响因素;;血清学反应的应用
和发展趋向;;;布氏杆菌病试管凝集试验;;;;;;;;;;鸡白痢平板凝集试验;;;;;;;;;;全血平板凝集反应判定标准;A;新城疫血凝与血凝抑制试验(二);;;;;血凝抑制试验(HI);;;;;;;;新城疫血凝与血凝抑制试验(一);;;;;;;;;;;;凝集反应概述;凝集反应的概念;凝集反应的概念;凝集反应的原理;通常细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷,周围吸引一层与之牢固结合的正离子,外面又排列一层松散的负离子层,构成一个双离子层,使颗粒相互排斥。
在有电介质存在的条件下,当特异抗体与相应抗原颗粒互补结合时,抗体的交联作用克服了抗原颗粒表面的电位,而使颗粒凝集在一起。;凝集反应的发生分两阶段
抗原抗体的特异结合。
在电解质的参与下,出现可见的凝集颗粒。;凝集反应的分类;直接凝集试验
细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。;试管凝
集试验;乳胶凝集反应
将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体的表面,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜电解质存在的条件下,出现的特异性凝集现象。;正向间接凝集反应;反向间接凝集反应
用特异性抗体致敏载体以检测标本中的相应抗原。;;凝集反应的分类;乳胶凝集试验
乳胶又称胶乳,是聚苯乙烯聚合的高分子乳状液,乳胶微球直径约0.8um,对蛋白质、核酸等大分子物质具有良好的吸附性能。
用它作载体吸附抗原(或抗体),可用以检测相应的抗体(或抗原)。
本法具有快速简便、保存方便、比较准确等优点。;协同凝集试验;桥梁凝集试验;沉淀试验概述;沉淀试验概念;;沉淀试验的分类;;;;利用可溶性抗原与抗体在半固体琼脂内进行扩散,若抗原与抗体对应,并且比例适当,就会出现白色沉淀线,此为阳性反应。
分为单向琼脂扩散试验和双向琼脂扩散试验两类。;单向琼脂扩散试验
本试验主要用于检测标本中各种免疫球蛋??和血清中各种补体成分的含量,敏感性很高。;双向琼脂扩散试验
本法主要是用于检测血清中各种免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙肝表面抗原等。缺点是需要时间过长,灵敏度不高。;将琼脂内电泳和凝胶内沉淀反应相结合。
具有分辨率高,灵敏度高,时间短,是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。
临床上常见的是对流免疫电泳和火箭免疫电泳。;对流免疫电泳
本法比琼脂扩散法的灵敏度要高10~16倍,而且反应时间短,可用于各种蛋白的定性和半定量测定。;火箭免疫电泳
当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。;禽流感琼脂扩散试验;禽流感概述;;;;禽流感琼脂扩散试验;;;;;;;;;;将琼脂板置于日光灯或侧强光下观察,若标准阳性血清与抗原孔之间出现一条清晰的白色沉淀线,则试验成立。;;炭疽环状沉淀试验;炭疽概述;;炭疽环状沉淀试验;;;;;;;小试管重叠的两液界面出现白色沉淀环,为阳性反应。
;;补体结合试验概述
;认识补体系统;;补体的激活;;;;补体结合试验具有高度的特异性和一定的敏感性,是诊断人畜传染病常用的血清学诊断方法之一。;猪伤寒补体结合试验;猪伤寒概述;;;猪伤寒补体结合试验;;;;;;;;;;中和试验概述;中和试验的概念;;;;中和试验的分类;;用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。
先根据病毒易感性选定试验动物及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度。
污染的病料需加抗生素,或用细菌滤器过滤,与已知的抗血清等量混合,并用正常血清加稀释病料作对照。混合后置37℃1h,分别接种实验动物,每组至少3只。分别隔离饲喂,观察发病和死亡情况。对照动物死亡,而中和组动物不死,即证实该病料中含有与该抗血清相应的病毒。
本法亦可用于毒素的鉴定和分型。;本法多将病毒作10倍递增稀释,分置2列试管,第一列加正常血清(对照组),第二列加待检血清(试验组)。
混合后,置37℃作用1h,将各管混合液分别接种选定的试验动物,每一稀释度用3-5只动物。
接种后,逐日观察,并记录其死亡数,观察结束后,计算LD50和中和指数,本法适用于大量样本的检测。
对病毒而言,通常中和指数大于50者判为阳性,10-49为可疑,小于10为阴性。;本法用以测定抗病毒血清的中和价.
将待检血清2倍递增稀释,加等量已知毒价的病毒液(与血清混合后,每一接种剂量含病毒100LD50),摇匀后,置37℃作用1h,接种实验动物后观察。;先将病毒稀释成适当浓度,使每0.2ml含80个-10
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