NCAM三种亚型高表达细胞模型的建立与低剂量铅对其表达的影响的开题报告.docxVIP

NCAM三种亚型高表达细胞模型的建立与低剂量铅对其表达的影响的开题报告

背景：

NCAM是一种胞外域（EC）、跨膜域（TM）及细胞内域（IC）均具有功能的蛋白质，可转录出多种亚型。NCAM在生物体内广泛存在，参与着胚胎发育、神经系统的形成、细胞增殖、细胞黏附等生理过程。近年来，越来越多的研究表明，一些环境污染物，如铅等对NCAM的表达和功能有一定的影响，因此NCAM成为了环境污染和健康领域的重要研究对象。为了研究铅对NCAM的影响，需要建立NCAM高表达的细胞模型。

研究意义：

①探究铅对NCAM表达的影响机制及其对生物体健康的危害。②为NCAM的功能研究提供高表达的细胞模型。③为NCAM亚型特异的研究提供相应的细胞模型。

研究方法：

首先，根据文献，筛选出NCAM不同亚型的编码基因，利用基因克隆技术将其分别克隆入表达载体进行构建。接着，采用电穿孔等方法将包含不同NCAM亚型的表达载体转染到不同细胞系中，如293T细胞、PC12细胞和Neuro-2a细胞等，并通过Westernblot、免疫荧光等方法检测NCAM在不同细胞系中的表达情况。最后，给予不同浓度的铅处理，检测铅对NCAM表达的影响。

预期结果：

成功构建出NCAM三种亚型高表达的细胞模型，并分别检测到不同亚型在细胞中的表达情况。在铅处理后，不同亚型的NCAM表达量将受到不同程度的抑制，不同细胞系间也存在差异。具体差异将在后续实验中进一步确定。

结论：

铅对NCAM表达的影响具有亚型特异性和细胞特异性，NCAM在不同亚型和不同细胞系中的表达情况和铅的剂量、时间等有关。通过本实验的结果，可以为探究铅的作用机制、NCAM功能的研究以及NCAM的临床应用提供一定的参考。