生物化学实验报告.pdf

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实验一糖类的性质实验

(一)糖类的颜色反响

一、实验目的

1、认识糖类某些颜色反响的原理。

2、学习应用糖的颜色反响鉴识糖类的方法。

二、颜色反响

(一)α-萘酚反响

1、原理糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后

者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性,

故此反响不是糖类的特异反响。

2、器械

试管及试管架,滴管

3、试剂

莫氏试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g,溶于95%酒精

中,整体积达100mL,贮于棕色瓶内。用前配制。

1%葡萄糖溶液100mL

1%果糖溶液100mL

1%蔗糖溶液100mL

1%淀粉溶液100mL

%糠醛溶液100mL

浓硫酸500mL

4、实验操作

取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀

粉溶液、%糠醛溶液各1mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充足混淆。

倾斜试管,当心地沿试管壁加入浓硫酸1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。察看

记录各管颜色。

(二)间苯二酚反响

1、原理

在酸作用下,酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。

此反响是酮醣的特异反响。醛糖在相同条件下呈色反响迟缓,只有在糖浓度较高

或煮沸时间较长时,才呈轻微的阳性反响。实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性

反响。

2、器械

试管及试管架,滴管

3、试剂

塞氏试剂:%间苯二酚-盐酸溶液1000mL,称取间苯二酚0.05g溶于30mL

浓盐酸中,再用蒸馏水稀至1000mL。

1%葡萄糖溶液100mL

1%果糖溶液100mL

1%蔗糖溶液100mL

4、实验操作

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取3试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各mL。再

向3支试管中各加入塞氏试剂5mL,充足混淆。将试管同时放入开水浴中,。察

看记录各管颜色。

(二)糖类的复原作用

一、实验目的

1、理解并掌握糖类的复原性质;

2、学习常用的判定糖类复原性的方法。

3、认识斐林氏、本尼迪克特试法查验糖的原理。

二、实验原理

复原糖是指含有自由醛基(如葡萄糖)或酮基(假如糖)的单糖和某些二糖

(如乳糖和麦芽糖)。在碱性溶液中,复原糖能将Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等金

属离子复原,而糖自己被氧化成糖酸及其余产物。糖类的这类性质常被用于糖的

定性和定量测定。

三、器械

试管及试管架,水浴锅电炉

四、试剂

1斐林试剂

甲液氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的溶液。乙液硫酸铜的质量分数为

0.05g/mL的溶液。

2本尼迪克特试剂

31%葡萄糖溶液100mL

41%果糖溶液100mL

5、1%蔗糖溶液100mL

五实验操作

六思虑题

1、斐林氏、本尼迪克特试法查验糖的原理是什么

2、试比较斐林氏、本尼迪克特试法的方法。

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实验二总糖的测定蒽酮比色法

一、实验目的

掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。

二、实验原理

强酸可使糖类脱水生成糠醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形

成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,该物质在620nm处有最大汲取。在10-100ug范围内

其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。这一方法有很高的敏捷度,糖含量在30ug

左右就能进行测定,所以可做为微量测糖之用。一般样

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