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miRNA--133a过表达对体外L6成肌细胞增殖分化作用机制的研究的开题报告

1.研究背景与目的

微小RNA（miRNA）是一类长约22个核苷酸的非编码RNA，能够结合到靶基因的3非翻译区域，并通过抑制转录或促进降解等机制对靶基因进行调节，从而参与多种生物学过程包括细胞增殖和分化。miRNA-133a作为肌肉特异性miRNA具有广泛的生物学功能，然而miRNA-133a对L6成肌细胞增殖和分化调控的机制仍然不明确。因此，本研究旨在探究miRNA-133a过表达对L6成肌细胞增殖和分化的影响以及相关的分子机制。

2.研究方法与方案

（1）依据前期文献报告，选用L6成肌细胞作为实验对象，并构建miRNA-133a过表达的L6细胞系和对照L6细胞系。

（2）采用MTT法、EdU染色法和荧光显微镜技术检测miRNA-133a过表达对L6成肌细胞增殖和分化的影响。

（3）通过Westernblot和PCR技术，检测miRNA-133a过表达引起的L6成肌细胞线粒体损伤和细胞周期调控及肌黄蛋白等肌肉特异性基因表达的变化。

（4）同时，采用实时荧光定量PCR和luciferase报告基因检测miRNA-133a对靶基因的调控作用，明确其在L6细胞增殖和分化过程中的调控机制。

3.研究意义

本研究的结果将有助于深入理解miRNA-133a在L6成肌细胞增殖和分化过程中的生物学功能和分子机制，为揭示肌肉细胞分化和肌肉疾病发生发展过程提供新的思路和实验依据。此外，MI-RNA-133a可能成为未来研发肌肉疾病相关治疗药物的一个靶标。