植物离体快繁.ppt

植物组织培养上海农林职业技术学院（上海市农业学校）植物科学技术系

模块三岗位提升

项目六组培试验方案设计任务12植物离体快繁技术任务13组培试验设计与分析任务14植物脱毒技术任务15组培工厂化生产

【知识点】掌握离体组织的再生途径组织培养的基本过程植物微体快繁方法【技能点】会植物快繁技术素质要求：培养学生无菌意识、创新意识、团队合作意识和生态环保意识；具有任务执行力，规范操作、注意安全；科学严谨、实事求是的工作态度。任务12植物离体快繁技术

一、植物离体快速繁殖的概念1、定义又称微体,快繁利用组织培养技术进行的一种营养繁殖方法。在无菌条件下，把离体的植物器官、组织、放在人工控制的环境中，使其分化、繁殖，在短时间内产生大量遗传性一致的完整新植株的技术。

2、意义和作用繁殖系数高短期获遗传稳定一致群体获无病毒苗，回复植物原有种性木本植物潜力大，可保持其杂合性推广良种的重要手段工厂化生产无季节限制原始材料少繁殖速度快繁殖周期短

3、应用珍惜植物品种和育种原始材料的扩大繁殖繁殖和保存无毒原种材料市场需求大、短期内常规繁殖方法难满足需求的植物经济效益高、难常规营养繁殖植物

二、离体快速繁殖程序（1）无菌培养体系的建立——启动培养（2）增殖培养（3）壮苗生根培养（4）生根苗驯化和移栽（5）再生植株鉴定

（1）无菌培养体系的建立从外植体选择、清洗、灭菌、接种和茎芽诱导，到获得茎芽稳定生长和增殖，茎芽繁殖数量可控制的整个时期。目标：获得无惧培养材料，诱导芽的发生。提供合适的试管环境使培养物（茎芽）的生长达到稳定。

无菌苗：在无菌条件下，用于试管内继代增殖的植物材料，称为无菌苗或“无菌母株”或“繁殖母株”。

外植体的灭菌在一定浓度的灭菌剂药液中浸泡灭菌。药剂灭菌的好坏关系着培养的成功率。根据材料、灭菌剂、经验等决定灭菌剂种类、浓度和处理时间。如：药剂对各种菌类的杀灭效果。如：材料对杀菌剂的忍耐力。把植物材料、灭菌剂及浓度、灭菌时间四者统一考虑。采用多种药剂配合使用。

(2)增殖培养促进培养物分化培养，反复继代增殖，达到需要数量。芽增殖途径对增殖结果影响大。芽增殖速度快、慢的关键是培养基。（适宜外源激素种类和浓度配比极其重要）。（细胞分裂素与生长素影响繁殖系数好不定芽质量）

试管苗的繁殖速率及计算m为无菌母株苗数，X为每个培养周期增殖的倍数n为全年可增殖的周期数

提高繁殖速度的方法：改进培养基：培养基种类、无机及有机成分、糖浓度、琼脂、植物生长调节剂的种类和浓度。（生长素比例大，不定芽生长健壮，细胞分裂素高，繁殖系数高，但组培苗细弱，要将二者比例调整到适宜水平。）改善培养条件：温度、光照（光强、光质、光周期）、湿度、培养器皿、通气状况、培养基的pH值等都与材料的增殖密切相关。培养物保存：当暂时不需要育苗或珍贵资源需保存时，采用低温（1-9℃）进行的中短期保存。

芽增殖过程中，值得注意外源激素的累积。长期继代增殖，外源激素的大量积累会造成各种畸形芽（茎）、玻璃化芽,影响不定芽质量。继代培养中需要酌情降低外源激素水平。

（3）诱导不定根形成目标：使诱导培养出来的芽丛或不定芽生出不定根，形成完整的小苗（Plantlet）。功能：保证组织培养不定芽生根，提高适应环境能力。壮苗和生根：对不定芽进行壮苗培养，诱导生根。

诱导生根的途径试管（瓶）内生根将组织培养茎芽的生根诱导同驯化培养结合在一起，直接将茎芽扦插到试管外有菌环境中，边诱导生根边驯化培养。试管（瓶）外生根在试管内的无菌培养基上诱导生根，生根苗移栽到有菌环境下驯化培养。

诱导根分化技术关键：1）调节外源激素种类和浓度。生长素/细胞分裂素。2）调节基本培养基营养组成。3）调大量元素中硝酸盐和铵盐的含量和比例。4）降低大量元素和微量元素的用量。5）调节渗透压，降低糖浓度。

(4)生根苗的炼苗驯化和移栽1）将小苗进行分级苗高和根数是评估移栽苗的重要指标。2）移栽前炼苗移植前要加强自然光照，使小苗逐渐适应外界环境。（在自然光的炼苗室中闭口自然光炼苗2-3周，开口炼苗1-3天。待小苗茎叶绿色加深，根系颜色由白色变为黄褐色即可移栽出瓶。）

生根苗的炼苗驯化和移栽：3）湿度锻炼：使小苗逐步适应周围环境的湿度。移栽前开瓶盖进行湿度锻炼。4）基质疏松：珍珠岩、蛭石、西沙，营养土、腐殖土等。5）调控光、温、湿等因子：生长季闭口炼苗期间调控光照强度、防雨水影响。部分遮光条件下移栽后管理，保持合适温度。

移苗注意：苗盘消毒：用0.1%的高锰酸钾对苗盘进行浸泡消毒或喷淋消毒。基质消毒：对已用过的需用0.1%高锰酸钾喷淋后用自来水冲洗干净。移栽技术：当根系打到一定长度（小于1cm）时移栽，带琼脂少，伤根轻，移栽时应将小苗基部的培养基冲洗干净，切忌伤根和茎叶。如根长，可