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植物组织培养技术植物细胞全能性认识主讲人:姜放军湖南生物机电职业技术学院教学重点与难点教学重点:1.细胞全能性概念及实现过程;2.细胞脱分化与分化概念;3.植物细胞分化途径;4.植物细胞离体分化影响因素;教学难点:1.细胞全能性表达过程;2.植物细胞分化途径教学内容一、植物细胞全能性及其实现;二、植物细胞的分化与脱分化;三、植物细胞离体分化成苗途径四、植株离体再生的影响因素(一)植物离体快繁的基本程序植物快繁的程序包括四个阶段:稳定无菌(或初代)培养体系的建立稳定培养体系的增殖、生长、增壮芽苗生根生根小苗移栽驯化1、稳定无菌培养体系的建立这个阶段包括母株和外植体的选取、无菌培养物的获得及培养物的稳定生长。通过需要3-6周。2、增殖培养、生长和增壮使已经达到稳定状态的培养物,通过不断继代培养进行增殖,达到所要求数量;以及培养物的生长和壮大的时期。增殖率是植株快速繁殖特别是商业性繁殖的重要指标。外植体在每次继代培养中,应能产生最大数量的有效繁殖体。3、芽苗生根将单个芽苗转移到生根培养基或适宜环境中诱导生根。(1)试管内生根降低无机盐浓度(1/2MS或者1/4MS),减少或不需要细胞分裂素,增加生长素的浓度。如:月季的生根培养基1/2MS+IBA0.5mg/l(2)活体生根(试管外生根)芽苗先在50-200mg/lIBA溶液中快速浸蘸或在含有相对高浓度生长素的培养基中培养5~10天,然后在温室中栽入生根基质上诱导,经常喷雾,给予高湿度环境(80%),几天后便可自行生根。生根基质(草炭:蛭石:珍珠岩5:4:1)4、生根小苗移栽驯化试管小植株的移栽驯化是试管苗从异养到自养的转变,由室内到室外的过渡,有一个逐渐适应过程。移栽前需对试管植株(1)先进行分级;(2)高光强炼苗一周左右打开瓶口,降低湿度,使其逐渐适应外界环境。1.移栽2.驯化管理(二)影响植物快繁的因素外植体继代培养次数增殖途径培养基培养条件移栽1、外植体外植体的来源:最适的为茎尖、带芽茎段,也可以利用叶片、子叶、根段、花器官组织等。外植体生理年龄外植体大小:不能太小,否则影响成活率。除非是用于脱毒苗的生产。2、继代培养次数继代培养次数影响器官分化率继代培养次数影响愈伤组织的生理状态继代培养间隔时间一般为20天左右继代培养2-3次三、芽增殖途径嫩梢扦插增殖途径丛生芽增殖途径器官发生途径胚状体途径原球茎途径四、培养基基本培养基:MS培养基应用最为广泛。对于某些植物及生根阶段,以1/4或1/2MS较好。蔗糖和葡萄糖浓度为2-4%。生根时稍低。植物生长调节剂:主要以细胞分裂素和生长素的配合使用,调节外植体的生长和分化。培养基的物理特性:以固体培养较为普遍,也有采用液体培养,如兰花原球茎的增殖。五、培养条件光照:1000-3000lx,阶段Ⅲ可增强。14-16h/天。温度:与植物的原产地相应。一般为25±2℃。有时可进行高温或低温的预处理。湿度:要求环境相对湿度不能太低,一般在70-80%。气体:要求培养基及培养瓶通气良好,同时及时转接。液体培养要求振荡培养,促进氧化交换。思考题:1、试述植物快繁的基本程序及影响因素。2、植物快繁的增殖途径有哪些?THANKS感谢各位,请指导!@YourName模板来自于
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