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SOCE中重要蛋白STIM1胞质区的结构与功能研究的开题报告

一、背景介绍：

SOCE是指当细胞外Ca2+浓度降低时，细胞内Ca2+-传输通道将被激活，这些通道是受到ERCa2+传输到质膜的刺激钙离子释放激活的。这种现象被称为“钙离子耦合”，它被认为是信号转导和细胞功能相关的重要机制。钙信号具有多种生理学和生化学作用，如细胞分化、增殖、分泌等。近年来，研究表明，SOCE对维持钙离子平衡和细胞生存至关重要，它的异常会导致许多疾病，如阻塞性肺疾病、自身免疫性疾病、神经退行性疾病等。

STIM1是SOCE途径中的关键蛋白，它被称为钙离子传输的“集装箱”，具有细胞内甘氨酸丰富的C端外段和胞质区域。它是ER膜上的钙传感器，当细胞内Ca2+浓度降低时，STIM1发生构象变化并依次移动到细胞质区域，激活Orai通道，将细胞外Ca2+传输到细胞内。因此，STIM1在维持细胞内钙离子平衡和SOCE过程中起着重要作用。STIM1缺陷会导致SOCE通路的异常，进而导致一系列的疾病，如艾滋病、散发性硬化等。了解STIM1的结构与功能对阐明SOCE通路为其他疾病的预防和治疗提供了新的思路和方法。因此，STIM1的结构与功能研究是将揭示SOCE通路的重要途径之一。

二、研究目标：

本研究的目标是通过多种实验方法，探索STIM1胞质区的结构与功能，进而深入揭示STIM1在SOCE通路中的作用机制。具体目标如下：

1.利用X-射线晶体学技术解析STIM1胞质区的高分辨率结构。

2.利用膜蛋白的高通量表达，通过制备膜蛋白颗粒，并利用电子显微镜技术研究STIM1与膜蛋白的相互作用。

3.构建STIM1胞质区的结构域和蛋白互作网络，揭示STIM1胞质区的功能机制。

三、拟采用的技术路线：

该研究将主要采用以下技术路线：

1.对STIM1进行蛋白质结晶和X-射线晶体学技术结晶，然后得到高分辨率的结构。

2.通过相关的膜蛋白表达技术，制备STIM1与膜蛋白相结合的复合体，并利用电子显微镜技术进行其形态学分析。

3.通过蛋白微阵列技术、GFP融合和二聚体亚单位交联法构建STIM1胞质区的结构域和蛋白互作网络。

四、研究意义和预期结果：

在本研究中，我们将揭示STIM1胞质区的结构与功能，为进一步研究和阐明SOCE通路的作用机制提供重要的理论基础。同时，该研究对于探索并发展新的治疗方法和药物在相关疾病中的应用将具有重要的意义。预计结果将包括STIM1胞质区的高分辨率结构、STIM1与膜蛋白相结合的复合体形态学分析和STIM1胞质区的结构域和蛋白互作网络，这将为SOCE通路的相关疾病的研究提供有价值的新思路和方法。