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miR--153对胶质母细胞瘤干细胞的抑制作用的开题报告

一、研究背景及意义

胶质母细胞瘤（Glioblastoma，GBM）是一种原发性恶性脑肿瘤，具有高度侵犯性和再生能力。根据统计数据，全球约有12万名患者被确诊为胶质母细胞瘤，其发病率为10/10万，而目前脑胶质母细胞瘤的治疗方案主要都是外科手术结合放疗和化疗，但长期疗效并不理想，这也促使人们对于胶质母细胞瘤治疗的研究更加深入。近年来，研究发现胶质母细胞瘤干细胞（Glioblastomastemcells，GSCs）是GBM的重要组成部分，具有较高的自我更新、多向分化和耐药性等特性，是GBM的病理学特征之一，并且对脑肿瘤的治疗产生一定的限制和影响。

miRNAs是一类长度约为20-22个核苷酸的非编码RNA分子，主要通过结合靶标mRNA的3末端，抑制该mRNA的翻译或降解，进而调节基因的表达水平。在肿瘤的发生和发展过程中，miRNAs扮演着至关重要的角色，能够影响肿瘤的增殖、侵袭和转移等生物学行为。近期的一些研究也表明，miR-153是一种对于胶质母细胞瘤干细胞具有抑制作用的miRNA分子，能够降低干细胞的自我更新和增殖能力，并对干细胞进行不同程度的凋亡。但是，目前对于miR-153对于GSCs的作用机制以及下游信号通路等问题仍存在一定的争议。

因此，本文旨在通过深入分析miR-153对于GSCs的影响机理和相关的分子调控机制，为GBM的治疗提供新的思路和参考，同时也为RNA干预技术及肿瘤分子治疗研究提供了新的机会。

二、研究内容和方法

1.主要研究内容

本文的主要研究内容将包括以下几个方面：

1）建立胶质母细胞瘤干细胞模型，筛选敏感和耐药细胞系，并评估其生长特性、表型及鉴定相应的免疫标记物；

2）寻找miR-153对于GSCs的作用靶点，并验证针对这些靶点的miR-153mimic或siRNA对GSCs生长、增殖的影响；

3）探究miR-153对于GSCs的作用机制，包括下游信号通路及相关蛋白的表达调控等；

4）在体内构建GSCs移植裸鼠模型，观察miR-153对于裸鼠生存期、药物敏感性等的影响。

2.实验方法

本文将采用GSCs体外培养、细胞实验、Westernblot、免疫组化、荧光定量PCR（qPCR）等方法进行。

如下是主要的实验流程：

1）培养GSCs，利用磁珠法或别的方法对干细胞表面标记物进行筛选及鉴定；

2）使用miR-153mimic或siRNA等方法对GSCs进行转染，根据转染效率和表达水平进行处理组筛选；

3）Westernblot和免疫组化等方法检测目标蛋白的表达，包括NF-κB、EGFR、CD44等；

4）qPCR检测miR-153表达水平和一些靶基因的表达水平；

5）组织学染色、细胞免疫荧光等方法观察结果并进行数据统计。

三、预期结果

通过对miR-153对于GSCs的分子机制和信号通路的深入研究，本文预期能够发现miR-153在GSCs中的作用机理及其对于肿瘤干细胞增殖、自我更新和药物敏感性等的影响，为GBM的治疗提供新的方法和策略，同时也可为RNA干预技术及肿瘤分子治疗研究提供新的机会。