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1、培养基的类型及其应用
标培养基配制特点主要应用
准类型
固体培加入琼脂较多菌种分离,鉴
养基定,计数
物半固体加入琼脂较少菌种保存
理性质培养基
液体培不加入琼脂工业生产,大
养基量繁殖
鉴别培添加某种指示剂或菌种的鉴定
目养基化学药品
的用途选择培添加(或缺少)某种菌种的分离
养基化学成分
注意:(1)选择培养基:
①特点:培养基中加入有利某种微生物生长繁殖所需的营养物质,以抑制或阻止
不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长;
②用途:选择出用于培养、分离出特定的微生物(如培养酵母菌和霉菌,可在培
养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐)
(2)鉴别培养基:
①特点:根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或者化学药品;
②用途:鉴别不同种类的微生物,如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品
中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽)
2、培养基的营养成分:水、无机盐、碳源、氮源。还要满足微生物生长对PH、
特殊营养物质以及氧气的要求。
3、无菌技术——(微生物接种技术的核心)获得纯净培养物的关键是:防止杂
菌污染。
(1)消毒指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物
(不包括芽孢和孢子)。分为煮沸消毒法,巴氏消毒法(不耐高温的液体,如牛
奶。原因:可以杀死牛奶中的微生物,并且使牛奶的营养成分不被破坏。)化学
药剂消毒法(如酒精、氯气、石碳酸等),紫外线消毒法(原理:破坏DNA的结
构)。
(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢
子。
分为灼烧灭菌法(接种环、接种针等金属工具、试管口)、干热灭菌法(吸管、
培养皿等玻璃器皿、金属用具,所用器械是干热灭菌箱)、高压蒸汽灭菌(培养
基、无菌水等,所用器械是高压蒸汽灭菌锅)
(3)防止杂菌污染的操作:在酒精灯火焰旁拔出锥形瓶瓶盖;在酒精灯火焰旁
打开培养皿一条缝;打开的锥形瓶的瓶口通过火焰;平板冷却凝固后倒置。
4、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算—称量—溶化—灭菌—倒平板
(1)各营养成分都有且有一定的比例。牛肉膏提供碳源、氮源和生长因子等;
蛋白胨提供碳源、氮源和生长因子等;琼脂作为凝固剂。
(2)要将平板倒置的原因:防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
5、纯化大肠杆菌
(1)纯化方法:微生物接种的方法,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温
箱里培养.在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐
渐减少,最后可能形成单个菌落.
②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,
经培养后可形成单个菌落.
(2)纯化原理:在数次划线后培养或在稀释度足够高的菌液里,可以分离到由
单个菌体繁殖而来的菌落。
(3)平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集
的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
①每次划线从上一次划线的末端开始,能使菌体的数目随着划线次数的增加
而逐步减少,最终能得到由单个菌体繁殖而来的菌落。
②划线时不要将最后一区的与第一区相连。
③操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能在在的微生物污染培
养物;每次划线之前都要为烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留
的菌种;划
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