Tiaml相互作用蛋白的筛选、鉴定及其功能的初步研究的开题报告.docxVIP

Tiaml相互作用蛋白的筛选、鉴定及其功能的初步研究的开题报告

一、研究背景与意义

人类基因组的突破性发现使得人们对于基因、蛋白及其相互作用的了解更为深入。作为基因表达产物的蛋白质相互作用对于生命的全部过程有着关键性作用。Tiam1作为一种重要的信号转导分子，在细胞极性、黏附等过程中扮演着重要角色。然而，其中与Tiam1相互作用的蛋白质却鲜少有详细报道。因此，深入研究Tiam1与相互作用蛋白的结构、功能及相互作用机制，将有助于揭示Tiam1的作用机制及其参与的生命过程。

二、研究目的

本研究计划通过构建Tiam1结构域的表达载体以及重组蛋白的纯化和鉴定，通过蛋白质相互作用检测技术筛选出与Tiam1相互作用蛋白，并结合生物信息学方法预测Tiam1与相互作用蛋白的互作机制及生物学功能。

三、研究内容及研究方法

(一)Tiam1结构域表达载体构建

通过PCR扩增得到Tiam1的结构域，克隆到表达载体中，进行序列鉴定并进行转染表达。

(二)重组蛋白纯化与鉴定

采用融合蛋白的表达策略，将Tiam1结构域和相互作用蛋白的结构域重组蛋白表达并纯化。采用Westernblot和SDS等方法进行蛋白鉴定。

(三)蛋白质相互作用检测技术筛选出与Tiam1相互作用蛋白

采用蛋白质芯片、酵母菌双杂交、蛋白质共沉淀等技术筛选与Tiam1相互作用的蛋白。

(四)生物信息学方法预测互作机制及生物学功能

结合生物信息学的方法，预测Tiam1与相互作用蛋白的互作机制及生物学功能。

四、预期研究结果

1、成功构建Tiam1结构域表达载体，成功获得Tiam1结构域重组蛋白和相互作用蛋白的重组蛋白。

2、成功筛选出与Tiam1相互作用的蛋白质，并预测互作机制及生物学功能。

3、理解Tiam1与相互作用蛋白质相互作用的机制及生物学功能。

五、研究意义

通过对Tiam1及其相互作用蛋白的筛选鉴定及互作机制的研究，可以为揭示Tiam1的生物学机制及其在疾病发生发展中的作用提供理论依据。同时，也可以为发现与Tiam1相关的新型药物、治疗手段提供新思路与方法。