淡水生物监测 环境DNA定量PCR法（征求意见稿）编制说明.docx

《淡水生物监测环境DNA定量PCR法》

编

编制说明

目录

1项目背景 1

1.1任务来源 1

1.2工作过程 1

2标准制定的必要性 3

2.1标准制定的意义和目的 3

2.2国外研究进展 4

2.3国内研究进展 5

2.4环境DNA监测技术研究进展 6

2.5相关国际标准或国外先进标准情况 7

2.6与国内相关法律法规和标准的协调关系 7

2.7现有工作基础 8

3标准编制依据和原则 8

3.1编制目的 8

3.2编制依据 8

3.3编制原则 8

4规范主要内容和使用范围 9

4.1适用范围 9

4.2术语和定义 9

4.3试剂 11

4.4仪器和设备 11

4.5环境DNA定量PCR监测方法 11

5质量控制与质量保证 24

5.1.质量控制 24

5.2.质量保证 25

6废弃物处理 25

7附录 26

7.1.附录A（资料性）环境DNA采样记录表 26

7.2.附录B（规范性）野外质量控制与保证 26

7.3.附录C（规范性）实验室质量控制与保证 26

8标准实施建议 26

9案例 26

9.1.河川沙塘鳢定量PCR检测 26

10参考文献 52

T/SEEPLAXXX—202X

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1项目背景

1.1任务来源

本文件由四川大学提出，并由四川省生态环境政策法制研究会归口，2023年申请立项，2023年10月16日被四川省生态环境政策法制研究会正式批准立项，由四川大学、南京大学、成都南易生态环境科技有限公司等单位起草。

1.2工作过程

按照标准编写要求，项目承担单位组织相关科研人员组成了标准编制组。编制组成员及时查阅国内外相关文献资料，按照GB/T1.1—2020给出的最新规定起草和编制。在前期项目研究、文献资料分析以及实际应用的基础上，编制组讨论并确定了开展标准编制工作的原则、程序、步骤和方法，目前形成标准（征求意见稿）及编制说明。主要工作如下：

（1）研究基础

2013年至2018年，编制组通过阅读文献和收集国内外相关资料，确定了构建基于环境DNA定量PCR技术监测水生生物的工作内容，并针对相关内容和关键参数开展了大量的科学研究工作，积累了大量的数据和实践经验，初步确定了环境DNA定量PCR监测水生生物多样性方法的基本框架和流程。

（2）编制启动

编制组接到标准制定任务后，立刻组织落实标准制定工作。确定由四川大学、南京大学、成都南易生态环境科技有限公司等为主要起草单位，并由来自高校、科研机构、企业的相关专家组成起草组，形成标准初稿。

（3）理论研究

2021年10月-2023年10月：为了按照文件要求，准确完成制定工作，标准起草组通过各种途径，收集并学习了《实验室生物安全通用要求》（GB19489）、《水质采样技术指导》（HJ494）、《生物多样性观测技术导则淡水底栖大型无脊椎动物》（HJ710.8）、《淡水浮游生物调查技术规范》（SC/T9402）、《实验室生物废弃物管理要求》（SN/T4835）、《河流水生态监测规范》（DB32/T4178）等基于传统形态学监测的标准导则，并进一步整理学习了《国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程》（SN/T4278）、《转基因产品检测实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测方法》（GB/T19495.5-2018）、《转基因植物品系定量检测数字PCR法》（GB/T38132-2019）、《家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法》

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（NY/T3677-2020）、《国境口岸炭疽芽孢杆菌荧光定量PCR检测方法》（SN/T2358-2009）等与环境DNA定量PCR相关的标准，收集和研究了众多国内外基于环境DNA定量PCR监测生物多样性和群落结构的方法和实际案例。经过资料分析和共性总结，初步对基于环境DNA定量PCR法监测淡水生物的方案进行梳